主题:【求助】液相色谱峰突然拖尾严重,高手快来呀

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春天的楚楚
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我们公司刚买的岛津lc020A的液相,我们专门打一个产品。
用的流动相是 乙腈:0.1%磷酸水溶液=15:85
色谱柱为 shim vp ods C-18柱

仪器和色谱柱都是新买的,用了不到20次(大约买了才45天)

前几次做样,出峰是正常的。

昨天下午我分析产品也是正常的,用的是纯甲醇冲洗柱子,并保留的。

等我今天下午在做样品是就发现出峰不正常了。本来响应有500的峰高,现在只有50,而且原来不拖尾的,现在尾巴拖的能从3分钟一直到8分钟。
我把昨天做过的样品再拿出来分析,也是拖的很严重,根本不成峰了。像是土丘一样。因为跟昨天比,是同样的样品,同样的流动相,(泵的压力也和昨天差不多)同样的波长,不知道为什么会出现拖尾那么严重的,该不会是柱子塌陷了吧,但是我柱子才用20来次,一共也才打了40针。怎么会呢?请遇到或者能解决的大虾帮帮我。

推荐答案:核桃回复于2008/06/08
补充答案:

风烟回复于2008/06/08

估计如1楼老师所讲,导致您的柱子有了问题,所以才会出现这样的峰。
现在的话,先冲洗柱子吧:
  用乙腈冲柱子,在您平时的流速的一半左右,想必要比较长的时间,把缓冲盐冲干净后,再用吧。

  如果冲它个一两天还是不见效果,就倒过来冲洗,接着倒着使用吧,像这样的情况,倒着冲应该是有效果的。

hrcren回复于2008/06/08

就是跟三楼的附件说的一样,加入一定量的三乙胺或醋酸能够抑制HPLC峰拖尾

maxtall回复于2008/06/08

the file from upstair is great:

Correcting Peak Tailing Problems in Reversed Phase HPLC
Peak tailing in reversed phase HPLC continues to be a common complaint. It is particularly prevalent when
separating basic compounds and, therefore, a source of constant problems to those analyzing pharmaceutical
compounds by HPLC.
Peak tailing causes a number of problems, including lower resolution, reduced sensitivity, and poorer
precision and quantitation. Figure 1 illustrates how resolution between peaks and sample sensitivity is
negatively affected by peak tailing. Figure 2 illustrates how accuracy and precision of an analysis can suffer
because of the inability of data systems to identify exactly where a tailing peak begins and ends.

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假如你上次用的流动相含有缓冲盐,就不能用含大量的甲醇流动相冲洗,缓冲盐会结晶,很危险
春天的楚楚
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没有缓冲盐,只是0.1%的磷酸水溶液,调节ph用的,应该没什么吧
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maxtall
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Correcting Peak Tailing Problems in Reversed Phase HPLC
Peak tailing in reversed phase HPLC continues to be a common complaint. It is particularly prevalent when
separating basic compounds and, therefore, a source of constant problems to those analyzing pharmaceutical
compounds by HPLC.
Peak tailing causes a number of problems, including lower resolution, reduced sensitivity, and poorer
precision and quantitation. Figure 1 illustrates how resolution between peaks and sample sensitivity is
negatively affected by peak tailing. Figure 2 illustrates how accuracy and precision of an analysis can suffer
because of the inability of data systems to identify exactly where a tailing peak begins and ends.
hrcren
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就是跟三楼的附件说的一样,加入一定量的三乙胺或醋酸能够抑制HPLC峰拖尾
风烟
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估计如1楼老师所讲,导致您的柱子有了问题,所以才会出现这样的峰。
现在的话,先冲洗柱子吧:
  用乙腈冲柱子,在您平时的流速的一半左右,想必要比较长的时间,把缓冲盐冲干净后,再用吧。

  如果冲它个一两天还是不见效果,就倒过来冲洗,接着倒着使用吧,像这样的情况,倒着冲应该是有效果的。
春天的楚楚
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估计不是加酸或是碱那么简单了

我分析的条件没有任何变化,怎么会突然就拖尾的不成峰型了呢?

会不会是柱子质量太差?
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