大家好,第一次做
液相,想请教各位一些问题,非常感谢各位的解答。
我先把基本情况介绍一下:
安捷伦
$$lc 1200 测定草酸,草酸(优级纯),所有用水均用超纯水配制。
测定条件:0.5mL/min(压力:50bar),柱温恒定30.0℃,停留时间15min,
pH=2.5的磷酸缓冲溶液与乙腈的体积比为55:45。
柱子:Luna 5µ C18(250mm*4.6mm*5µm)
(文献上的方法是:用C18的(250mm*4.6mm*5µm),流速1.0mL/min,柱温:30℃,停留时间3min,pH=2.5的磷酸缓冲溶液与乙腈的体积比为80:20,我按照这种方法做不出来,三分钟太短,峰都还没有出来.)
出峰时间随浓度不同而有变化,
1 ppm的时候在11.533min峰面积是100%,
5 ppm的时候在8.707和11.519min时均有峰,峰面积分被是70%和30%,
10 ppm的时候在8.706和11.532min时峰面积分别为78&和22%。
改变了溶液和乙腈的体积比(从80:20,75:25,70:30,65:35,60:40,55:45,50:50),发现只有55:45时出的峰要少点,峰面积在尖峰处要大些(我不懂如何判定什么样的峰才是比较好),改变流量,从0.3,0.4,0.5,0.6,1mL/min发现1mL/min压力有110左右,后面还是用了0.5。
想请教的问题是:
如何摸索测定草酸的最佳条件,需要改变哪些参数,如果各位有做过相关的或是能给我宝贵意见的,十分感谢。
我知道很多基础的东西还需要学习,我也正在学习,想借助论坛的平台和有经验的网友交流,谢谢。