大家好，我做了几次替米考星的实验，用的是农业部1025号公告-10-2008.前几次标品一直走到很好，保留时间和响应值的重复性都很好，可是在6月10号，各条件都不变，突然反式异构体变成了分叉峰，但是顺式异构体还很正常，而且保留时间还后移了将近10分钟，重新配制流动相，高标准品，换另外一台机子（waters和agilent两台），这种现象都无法改变，现在的保留时间和响应值重复性也还可以，不明白什么原因？请各位大虾指教一二！领导在催促试验，实在着急啊！

推荐答案：燕麦粥回复于2009/10/02

弱弱的问一下，替米考星是什么？

补充答案：

柏坡回复于2009/06/15

这种没有做过，您用的是离子交换柱吗？检测柱子情况了吗？既然以前能做，还是建议你看看方法有无出入。

戈壁明珠回复于2009/06/20

不知您的柱子压力正常吗？有没有污染？

gase001回复于2009/06/23

呵呵，我以前做过替米考星和磷酸替米考星，你说的那个情况，我也遇到过，可能是你的柱子污染或者流动相污染了。重新配好或冲洗好色谱柱。
还有这个产品对色谱柱的损伤很大，我们对这个产品检测花了不少的色谱柱。

feiyuankj回复于2009/08/25

【简介】
本试剂盒适用于肌肉（猪、鸡、鱼、牛，羊）、肝脏（猪、鸡、牛，羊）、蜂蜜、牛奶、鸡蛋中泰乐菌素和替米考星的残留检测。

【原理】
本试剂盒采用间接竞争ELISA原理检测泰乐菌素和替米考星残留。检测时，包被有包被抗原的酶标板的每一孔中先后加入标准品或样品处理液，抗体工作液，游离的泰乐菌素或替米考星与固定在酶标板上的半抗原竞争抗体结合位点。通过洗涤，与酶标板上半抗原结合的抗体被吸附在酶标板上，而游离药物与抗体的结合物被除去。然后加入酶标二抗，通过孵育，洗涤，加入底物等步骤，最后加入终止液使颜色由蓝色转变为黄色，在450nm处测量吸光值。吸光值与样品中药物的浓度成负相关。

【技术参数】

最低检测限
猪肉————20ppb；猪肝————20ppb；
鸡肉————20ppb；鸡肝————20ppb；
羊肉————20ppb；羊肝————20ppb；
牛肉————20ppb；牛肝————20ppb
鱼肉————20ppb；蜂蜜————20ppb；
牛奶————10ppb；鸡蛋————20ppb

交叉反应率
替米考星———————————100%
泰乐菌素 ——————————180%

回收率
各种组织回收率在60%至120%之间。

精密度
本试剂盒板内板间变异系数<15%

【样品处理方法】
所有样品应于2~8℃避光冷藏保存。
1. （猪、鸡、鱼、牛、羊）肌肉，（猪、鸡、牛、羊）肝脏，蜂蜜
（1）称取均质样品2.0 g ± 0.02 g于50 mL离心管中；
（2）加入组织提取液10 mL，漩涡5min，4000 rpm室温离心5min；
（3）取上清液1mL于10 mL离心管中，加入1 mLpH调节液，加入5ml氯仿，漩涡混匀1min；
（4）4,000 rpm室温离心5min；取下层氯仿于另一10ml离心管，40 ℃ ± 5 ℃水浴，氮气吹干；
（5）加入2ml正己烷，样品稀释液2mL，漩涡1min；
（6）4,000 rpm室温离心1min；
（7）吸尽上层正己烷层和中间浑浊层，取下层澄清水相300μL于EP管中，取50ul检测。
（样品可4℃避光短暂保存；样品稀释倍数为12）

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