主题:【求助】波长的选择和截止波长关系

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lianhaibo
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液相色谱做检测时,需要设置检测波长,有时在资料上直接给出了,就直接用了.看的资料多了,又出现一个"截止波长",百度里查了一下,不太理解.请各位前辈指点指点!!!
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niuyuehua
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例如纯甲醇的截至波长210nm,那选择波长如果小于210nm,灵敏度就比较低,当然也不是小于210nm甲醇就不能使用,那要看使用的比例问题了,此时最好使用乙腈,乙腈的截至波长190nm.
  另外缓冲盐在低波长下也有很强的吸收,造成极大的干扰,例如三氟乙酸,磷酸盐等,此时选择波长就要注意,在DAD下看一目了然。
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北方海盗
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原文由 niuyuehua 发表:
例如纯甲醇的截至波长210nm,那选择波长如果小于210nm,灵敏度就比较低,当然也不是小于210nm甲醇就不能使用,那要看使用的比例问题了,此时最好使用乙腈,乙腈的截至波长190nm.
  另外缓冲盐在低波长下也有很强的吸收,造成极大的干扰,例如三氟乙酸,磷酸盐等,此时选择波长就要注意,在DAD下看一目了然。
谢谢,学习了!
pandora98
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原文由 lianhaibo 发表:
液相色谱做检测时,需要设置检测波长,有时在资料上直接给出了,就直接用了.看的资料多了,又出现一个"截止波长",百度里查了一下,不太理解.请各位前辈指点指点!!!

做纯度检测的话,一般要求检测波长比截止波长高20nm,所以用乙腈做流动相最低波长一般在210nm以上,很少有更低的,甲醇不适合与低波长。
lianhaibo
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了解了一些,
我最近做了个缩二脲的样品(练习),标准上的检测波长是200nm,
流动相是甲醇:磷酸二氢钾(pH6.0)=5:95,一直做的不好,这和我的液相检测器的波长范围是190nm——***有没有关系呀。

有水有渝
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低波长的平衡时间要很长,用甲醇时,只在不是走梯度还能用,一走梯度就不行了,基线漂的很厉害.
niuyuehua
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原文由 lianhaibo 发表:
了解了一些,
我最近做了个缩二脲的样品(练习),标准上的检测波长是200nm,
流动相是甲醇:磷酸二氢钾(pH6.0)=5:95,一直做的不好,这和我的液相检测器的波长范围是190nm——***有没有关系呀。



    液相检测器的波长范围最低190nm,是指氘灯最低检测波长是190nm,在200nm下检测此样品,如果氘灯是国外的应该问题不大,如果是国产的液相,灵敏度比较低,结果可信度比较低了,何况磷酸盐也有吸收的。。。。
  另外注意两点:1.甲醇一定用进口色谱的,因为国产的甲醇干扰太大
              2.如果产品重现性差,你可以通过DAD观察200——210nm下光谱吸收的区别,没有DAD的话,就用VWD分别做这两个波长下的重现性。
    理论上选择波长要比截至波长大20nm以上
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