第一次做中药含量测定,用到高效
液相色谱仪,使用面积外标法测定含量:
(一)对照品溶液 精密称取氢溴酸东莨菪碱5mg,置10ml容量瓶中,加流动相使溶解,并稀释至刻度,摇匀,制成每1ml含0.5mg的溶液(东莨菪碱重量=氢溴酸东莨菪碱/1.445)。
供试品溶液 精密量取本品溶液5ml,置锥形瓶中,加入2mol/L盐酸溶液20ml,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,滤过,滤渣和滤器用 2mol/L盐酸溶液10ml分数次洗涤,合并滤液和洗液,用浓氨试液调节pH值至9,用三氯甲烷振摇提取4次,每次10ml,合并三氯甲烷液,回收容剂至干,残渣用流动相溶解并移至5ml量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。
在这里对照品的稀释倍数是不是10倍,供试品稀释倍数是不是1 倍,取样量分别为5mg和5ml。
(二) 精密称取105℃干燥至恒重的麻黄碱对照品10mg,置100ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取2ml,置 25ml量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得(每1ml含盐酸麻黄碱8ug)。
精密量取本品溶液2ml,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 25ml,称定重量,超声处理(功率160W,频率50kHz)45分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液1ml,置中性氧化铝柱(100~200目,1.5g,内径1cm)上,用50%甲醇洗脱,收集洗脱液约9ml,置10ml量瓶中,加磷酸1滴,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
在这里对照品的稀释倍数是不是1250倍,供试品稀释倍数是不是125倍,取样量分别为10mg和2ml。