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主题：【讨论】RPHPLC中亲水性大分子聚合物难以洗脱的原因

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dacongyigen
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发表于：2010/08/10 15:41:48 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
经常见到资料说，反相色谱法中，亲水性大分子聚合物（蛋白质、核酸等）难以从色谱柱中洗脱，甚至是永久性的。
反相流动相的极性较大，且多数水组分含量较高，按理应该更容易洗脱吧
请问原因何在？
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2010/8/10 21:48:37 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主实际试验过吗，那些资料分析的物质或选择我色谱条件有没有什么特殊的地方。
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dacongyigen
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2010/8/11 12:24:05 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
楼主实际试验过吗，那些资料分析的物质或选择我色谱条件有没有什么特殊的地方。

是这样子的，在岛津VP ODS色谱柱的注意事项上说的，他们要求，为了避免这种情况的出现，应该使用保护柱

我没有试过，我觉得原因可能是大分子容易堵塞填料的微孔，从而导致柱效降低
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有水有渝
xky0230699
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2010/8/11 12:54:18 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一个与填料的孔径有关，还有一个可能是怕生物大分子在有机相中析出吧，我看很多蛋白沉淀剂都用乙腈什么的，没有做过这一类分析，建议你可以直接咨询岛津的色谱柱应用工程师。
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