C18柱差别咋这么大
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇—水(25︰75)为流动
相;检测波长为210nm。理论板数按单硝酸异山梨酯峰计算不低于3000。单硝酸异山梨酯峰与2—单
硝酸异山梨酯峰的分离度应不小于2.0。
测定法 取本品约25mg,精密称定,置25ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为供试品
溶液。另取硝酸异山梨酯、2-单硝酸异山梨酯和单硝酸异山梨酯对照品各适量,精密称定,用流动
相溶解并制成每1ml中约含2.5μg的溶液作为对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件,取对照品溶
液20μl,注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使单硝酸异山梨酯峰的峰高为满量程的20%~25%,精
密量取供试品溶液和对照品溶液各20 μl ,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至硝酸异山梨酯峰保
留时间的1.1倍。按外标法以峰面积计算,含硝酸异山梨酯与2-单硝酸异山梨酯分别不得过0.25%,
其他单个杂质按外标法以单硝酸异山梨酯峰面积计算不得过0.25%,杂质总量不得过0.5%。
首先,我们用某国产品牌色谱柱柱(C18 5μ 250x4.6mm)测试了分离度,如图:
由上图可知:虽然单硝酸异山梨酯峰与2—单硝酸异山梨酯峰的分离度的分离度达到要
求,但是峰形较差。这样淘汰了该色谱柱。
然后,我们分别用博纳的色谱柱(Venusil x BP C18(2) 5μ 250x4.6mm Cat.NO:
VX952505-2 S/N:V9510525BMO112b)和某国外品牌色谱柱(C18 5μ 250x4.6mm)检测
了同批样品。色谱图分别如下:
博纳的色谱柱谱图
某国外品牌色谱柱谱图
根据以上测定结果大家帮参考下,用哪根色谱柱更好些?
我写这篇文章的目的,不是说哪个色谱柱好,而是不同型号、不同品牌的色谱柱差别很
大,针对某个产品选择色谱柱时,可以进行多种尝试,总会得到比较满意的结果。并且这
根色谱柱不适合做这个样品,也许适合其他的品种。
原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
工艺填料不同结果肯定也不同了