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毛细管电泳（CE）

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主题：【讨论】求解＝毛细管电泳台阶跃式图谱是何原因？

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flysky97

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发表于：2013/10/08 12:57:53 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

求解：毛细管电泳台阶跃式图谱是何原因？

之前的一段实验新机器，新实验，势如破竹，一直接近结题，后来文章因为要补些数据，是由同组后来的人员做的实验，一段时期，检测出现特异性台阶式峰，有时候反复冲洗毛细管或者更换都未见情况有所改善，后面因为一些特殊的原因而没有机会去验证其原因何在，如今，将这些图谱传上来，供大家讨论，恳请高手能指点迷津……

毛细管电泳仪胶束电泳检测苯乙醇胺类物质，以硼砂（Na₂B₄O₇－NaOH）为背景电解质，同时加入表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）组成运行电泳介质，采用毛细管胶束电泳分离结合二极管阵列（PDA）检测器检测，检测仪器为Beckman P/ACE MDQ毛细管电泳仪(美国贝克曼公司)；二极管阵列(DAD)检测器200 nm检测。

该帖子作者被版主 wy20071722加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖

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2013/10/8 15:59:30 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

flysky一直都很严谨，写帖子从不含糊，真是榜样

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flysky97

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2013/10/8 17:28:10 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 nini2006(nini2006) 发表:
flysky一直都很严谨，写帖子从不含糊，真是榜样

真正的原因是：

家里上不了网，所以先把文章弄成图片了再传上来，

效果可能不太理想，希望大家谅解……

嘿嘿，不过俺把版主的夸奖领走了……

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nini2006

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2013/10/8 18:38:55 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这个现象比较奇怪，我怀疑电极有问题

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wy20071722

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2013/10/8 19:06:39 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

图片不是很清楚，电流图和电泳图最好分别标出来。貌似电流是正常的，但是电泳图有台阶，不知道我有没有看错。可能有以下几个原因：
1.进样量太大，这个似乎不是。
2.Buffer有污染，特别是进样端的buffer。
3.瓶帽有污染。
4.冷却液有污染。

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beyond1977

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2013/10/9 10:45:07 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

个人认为，柱子和缓冲液的可能较大，尤其是柱子。我们以前也有碰到这种情况

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cpudaxiao

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2013/10/11 0:14:46 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

SDS浓度太大，或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

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flysky97

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2013/10/11 9:08:12 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 beyond1977(xsh6743) 发表:
个人认为，柱子和缓冲液的可能较大，尤其是柱子。我们以前也有碰到这种情况

我觉得缓冲液的可能性更大些，柱子是新换的……

楼上说是SDS和NaOH浓度的原因，我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别，因为她做的时候，是用的我原来的标准液

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2013/10/11 9:15:46 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
SDS浓度太大，或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

缓冲液的怀疑是最大的，我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别，两者不均一，因为她做的时候，是用的我原来的标准液

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2013/10/11 10:30:31 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 flysky97(flysky97) 发表:
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
SDS浓度太大，或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

缓冲液的怀疑是最大的，我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别，两者不均一，因为她做的时候，是用的我原来的标准液

最好现用现配。尤其是含SDS和氢氧化钠的buffer。

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2013/10/11 12:25:47 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
原文由 flysky97(flysky97) 发表:
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
SDS浓度太大，或者是NAOH导致的PH 偏高或是偏低。

缓冲液的怀疑是最大的，我现在想想也有可能是标准品配制与后来上样Buffer间可能有一些差别，两者不均一，因为她做的时候，是用的我原来的标准液

最好现用现配。尤其是含SDS和氢氧化钠的buffer。

嗯，应该是这样的……

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