维权声明:本文为jhjs原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
高效方法检测名贵药材
名贵药材很多种,有一种叫木香。 它花色艳丽,形状各异,香味迷人,漂亮极致。根、茎、叶也有着非常不菲的药用价值和营养成分。 药用部分主要来自根部,它气香特异,味微苦,
含有丰富的去氢木香内酯,木香烯内脂,木香萜醛,木香内酯,二氢木香内酯,α-环木香烯内酯,β-环木香烯内酯,土木香内酯等药物成分。另外根部还含天冬氨酸,谷氨酸,甘氨酸,甘氨酸,瓜氨酸等20多种氨基酸,营养成分也非常丰富。 叶含蒲公英甾醇,α-香树精硬脂酸酯,β-香树精棕榈酸酯,羽扇醇棕榈酸酯等多种香精、香料成分。 木香具有行气、止痛、止血、健脾、消炎、抗菌、降压等多种药物功效,可用于多种疑难病症治疗。
说明:以上几张图片是网上截图,不是本人所拍,在这只是为了说明下木香药材的外观及美感,希望大家能够理解。 既然木香价值这么高,检测它就显得尤为重要,方法选择尤为关键。下面我们就介绍几种高效
液相色谱法检测该药材中木香烃内酯、去氢木香内酯方法。
1.实验部分
1.1原理 精密称取该药品适量,超声波提取后经进样器注入高效
液相色谱系统,通过C18色谱柱分离,紫外检测器检测,外标法(保留时间定性,峰面积定量)计算,得出所测成分含量。
1.2 仪器及试剂
仪器:高效
液相色谱仪(紫外检测器+高压恒流泵+柱温箱),四号筛(药典筛),超声波清洗器,溶剂过滤器,电子天平(0.0001级)等。
试剂:甲醇(色谱纯),超纯水
1.3样品制备
对照品溶液制备:准确称取木香烃内酯对照品、去氢木香内酯对照品各5mg于50ml容量瓶中,加甲醇至刻度,配制成含木香烃内酯对照品、去氢木香内酯各0.1mg/ml的混合对照品溶液,备用。
供试品溶液制备:取本品适量充分粉碎后过四号筛,准确称取过筛粉末0.3g,置于具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,放置过夜后超声处理30分钟,放冷,再次称定重量,用甲醇补足减少的重量,摇匀,0.45μm微膜滤过,待测。
1.4 色谱条件检测器:紫外检测器
检测波长:225nm
色谱柱:Promosil C18,4.6 X 250mm,5μm
流动相:甲醇-水(65:35)
流速:1.0ml/min
柱温:室温
进样量:10μl
2、实验过程及色谱图
对照品色谱图
供试品色谱图:
计算公式:样品中各物质的含量计算公式:
D----供试品中被测物含量,以(%)表示
V----供试品稀释的总体积,单位(mL)
P3----供试品溶液被测物峰面积值
P4-----对照品溶液被测物峰面积值
ρ2----对照品被测物浓度。单位为mg/ml
m2----样品质量,单位(mg)
通过计算木香烃内酯的含量大概是0.8%,去氢木香内酯的含量大概是1.6%,总含量2.4%,远大于药典中要求的1.8%,该木香药材满足药典要求,属合格品。
这个检测时间有点长,我们不防改变下色谱条件,缩短些时间。那就把柱温调整到40℃,看下结果。
对照品色谱图:供试品色谱图: 看来有效果,检测时间是短了,但分离度也相对差了点,不够理想。那我们再不防改变下色谱条件,争取把分离度效果弄好些。那就调整下流动相,甲醇-水(60:40)
,看下结果。对照品色谱图:
供试品色谱图: 这下效果好多了,比较完美。3. 说明 方法就是这样,如果只求把实验做完,一般的参考方法也都可以,但如果想要达到更完美的效果,比如提高检出限,缩短检测时间,提高分离度,提高重复性等尽可能达到又准、又快、又灵敏,那就得对仪器结构及检测方法做些文章了。比如改变下仪器连接方式,增加个在线脱气机,或是调整下色谱条件等。 色谱条件中的那些条件大多情况下都可以调整,只是达到的效果各有不同。提高灵敏度(降低最小检出限)一般调整检测波长,选择更灵敏的检测波长,有时也会换用背景更低的流动相;缩短检测时间一般调整流动相各成分比例(比如增加有机相比例)和升高色谱柱控制温度,有时也换色谱柱,或增加泵流速等;提高分离度一般调整流动相各成分比例(比如减少有机相比例)和降低色谱柱控制温度,有时降低泵流速,减少进样量,甚至换色谱柱等。 以上是自己实验中的一点心得,希望能对实验结果要求高的同志们做个参考,不足之处敬请指点!