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液相色谱（LC）

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主题：【求助】求助：DL-丝氨酸含量的液相检测方法或滴定法

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发表于：2017/11/16 09:04:01 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

DL-丝氨酸含量的液相检测方法或滴定法，最近液相做下来发现重新性较差

该帖子作者被版主 夏天的雪加 2积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖

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2017/11/16 16:32:15 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

氨基酸，需要用衍生方法测定，或者氨基酸测定仪。

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夏天的雪

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2017/11/16 16:33:07 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

您是怎么做的，色谱条件和样品处理方法

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2017/11/16 16:59:44 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 夏天的雪(bingwang228) 发表:
您是怎么做的，色谱条件和样品处理方法

没有氨基酸检测仪
1、缓冲溶液制备

精密称取一定数量的四硼氢酸钠，溶解在水中，使水溶液中的样品溶度为0.05mol/L, 加2N 氢氧化钠溶液调节PH9.5,混合均匀，此溶液应当保存在4℃的条件下。
2、衍生化试剂制备
精密称取 0.3430g 邻苯二甲醛和0.1472g N- 乙酰-L-半胱氨酸, 转移到同一25ml的容量瓶中，加入5ml的无水乙醇超声直到溶解，用缓冲溶液稀释到刻度，混合均匀，应当现配现用，并避免光照。
3、样品溶液制备
精密称取0.1g样品，加入到250ml的容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，必要时进行超声。
4、仪器上进行衍生处理
5、色谱条件
仪器: Aglient 1260
色谱柱: YMC C18 250×4.6mm ID, 5μm
流速: 1.0ml/min
柱温: 30℃
波长: 334nm
6、流动相制备
(1) A相：称取4.1g无水乙酸钠加入适量水溶解，定容至1000ml，使用水系膜过滤，超声脱气。
(2) B相：乙腈：使用有机膜过滤，超声脱气。
(3) A相：B相=85:15

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