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主题：【已应助】药物BBB的通透性，LC-MS预试成功，正式试验却检测不到，求真相

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发表于：2019/06/21 14:24:10 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验是测定一系列多肽的BBB通透性，大鼠灌流后提取脑中药物进行检测，检测方法起初采用RP-HPLC，没有检测到信号。考虑可能是灵敏度不够，改用液质联用（ESI离子源），流速：0.3ml/min，色谱柱：150×4.6mm，5um，没有保护住。
预实验中已检测到待测药物峰以及内标物，但后来正式实验中测了很多次，却基本检测不到待测药物，只能测到内标物，只有一两次检测到，且峰面积非常小。再次重复预实验，依然没有测到待测药。更换文献报道能过BBB的药物，仍检测不到（按理应该可以）。我们的整个实验过程与预实验时一模一样，为什么现在就测不到了呢，是不是检测这一步出了问题，（0.3ml/min采用常规4.6um的柱子合适否）还是其他什么地方有问题？
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2019/6/21 14:41:53 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉还是质谱参数没优化好 重新调谐试试
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2019/6/21 16:39:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
此外直接走标曲响应怎么样，如果标曲正常，可能就是基质效应引起的，或者分解了。
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welewolf
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2019/6/23 13:20:53 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先用液质测几针标准品，如果测试正常，那么可能是基质效应的问题。如果测试不正常，可能是待测物的质谱参数没有优化好。
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