主题：【第十五届原创】西达本胺促进SCLC细胞系组蛋白乙酰化

西达本胺促进SCLC细胞系组蛋白乙酰化

  为验证西达本胺是否上调SCLC细胞系的乙酰化水平，我们使用Western blot检测了不同浓度（IC10、IC20、IC50）西达本胺处理48 h后，SCLC细胞系中乙酰化组蛋白H3、H4表达水平，并以组蛋白H3、H4表达水平为对照。结果如图所示。在四种亚型细胞系中，总组蛋白H3、H4表达水平无变化，乙酰化组蛋白H3、H4表达量随加药浓度增大而增多，这证明了西达本胺对SCLC细胞系组蛋白乙酰化的促进作用，这种作用呈剂量依赖性。

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西达本胺通过线粒体凋亡途径诱导SCLC细胞系凋亡

我们的功能实验表明，西达本胺可剂量依赖的促进SCLC细胞系凋亡，但其机制尚未明确。依据国内外报道，西达本胺主要通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。除此之外，西达本胺能使线粒体DNA双链断裂，发生损伤。为探究其是否通过此途径在SCLC细胞系中发挥作用，我们检测了加药48 h后，H69、H446、H526、DMS114细胞中由线粒体介导的Caspase信号通路相关蛋白Bcl-2，Bax，细胞色素C，Caspase 9，cleaved Caspase 9，PARP，cleaved PARP，Caspase 3，cleaved Caspase 3以及DNA双链断裂标志物 γH2AX表达水平。Western blot结果显示，Caspase 9，PARP ，Caspase 3表达水平无明显变化，Bcl-2表达下调，其余蛋白表达均上调。这些结果表明，在SCLC细胞中，西达本胺可以通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡。

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西达本胺通过抑制Cyclin-CDK复合物活性阻滞SCLC细胞系周期

据文献报道，不同HDACI对不同细胞阻滞时相不一致。为验证西达本胺对SCLC细胞周期的作用，我们检测了经西达本胺处理48 h后，H69、H446、H526、DMS114细胞中细胞周期相关蛋白的表达水平，如图所示。在H69、H526、DMS114细胞系中P21、P27表达上调，Cyclin A2与CDK2表达下调，说明西达本胺阻滞H69、H526、DMS114于S期。在H446细胞系中Cyclin E1与CDK2表达下调，说明西达本胺阻滞其于G1/S期。

小结