Waters SugarPak1糖柱使用指南
在使用Waters SugarPak1糖柱前，我们建议您仔细阅读使用说明书并考虑以下的忠告和建议：
1）将Waters SugarPak1糖柱连接到ＨＰＬＣ系统上。
2）设置流速在0.1～0.2ml/min直到柱温达到70℃。
3）在柱温达到70℃时，流速增至0.6ml/min．改变流速应该以0.1ml/min为增量，待反压稳定后再继续增加事。
特别提示：最大流速不应超过0.6ml/min。
　　 Waters SugarPak1柱是用分析糖产品（甜糖＼甘蔗＼淀粉等作物）在水解过程中的产物，以及用来做糖产品的质检查，能够将葡萄糖＼果糖＼麦芽糖＼麦芽多糖从典型的玉米糖浆的高聚物中分离出来，也可用于酒发酵过程中跟踪监控发酵糖的减少和酒精的产生。

流相的要求：
此色谱柱由钙基树脂填装而成，氢离子或其它离子会取代钙离子，或是引起与柱中糖的转换，尤其是像蔗糖这样易于转换的糖，因此推荐在流动相中加入一定量的钙离子不保持平衡和防止与样品的转换。
推荐的流动相为去离子水的无菌水，大于2兆欧的电阻率，含EDTA钙钠盐约0。0001M（50mg/L）。水中应不含多价离子，尤其是过渡金属元素和重金属离子。使用前需要真空泵通过0.45um或更小孔径的滤膜除去细菌和其它颗粒。如果系统连续使用不止一天，请将流动相置于锥瓶中放在搅拌器或电炉上，用铝箔封上瓶口以减小蒸发，用前将流动相烧至沸点几分钟，使用时保持温度70~90℃，这个操作能够保证气体（尤其是CO2）不再重新溶解到流动相中，同时也会防止微生物的滋生。
要保持装流动相的瓶子干净，有盖子，且新鲜，流动相需要每24小时重新配制。
平衡：
为了保证新柱子能在分析使用之前得到足够的钙离子的平衡，我们推荐使用以下程序：1）将柱子按照通常使用的反方向安装（标签上的箭头指向柱子的入端口）；
2）用至少100ml的0.001M EDTA钙盐溶液在90℃ 用0.5ml/min流速反冲柱子，500mg/L的钙盐的浓度大约为0.001M；
3）将柱子反过来（回到通常的流动方向）用分析所用流动相冲柱子，（用与上一上步骤同样的条件）直到基线平稳方可使用。
注意事项：
通常推荐压力不超过2000psi，最大流速不超过0.6ml/min(70℃)。
⊙不要在流动相中使用氯化钙，硝酸钙以及其它强酸的钙盐，这样会腐蚀柱子，破坏填料。
⊙流动相中有机相的最大含量为5%（V/V），样品中少量的乙腈、乙醇、甲醇和异丙醇不会影响柱子的性能。
⊙柱子的温度不要超过95℃。通常高温会带来高的分辨率，但在90~95℃之间几乎没有变化，70℃以下对许多糖的异构体的分离不能提供足够的分离度，对于乙醇的定量，柱温应在75℃。
⊙柱温的快速变化不会对柱子带来什么反作用，如果柱子在60℃以下，那么最高的流速为0.2ml/min，由于水在低温时粘度高，因此高的流速会来很高的反压。
⊙定期反向冲洗色谱柱（每5L流动相之后），这将会有效地延长色谱柱的寿命。
⊙流速的变化不能超过0.5ml/min，流速变化应该缓慢进行，建议改变流速时以0.1ml/min为增量，直到反压稳定后再继续增加流速。任何的流速变化均要在不超过0.5ml/min下进行。
⊙在溶剂输出系统中压力限制的设定应比普通的工作压力高出几百psi，从而避免任何仪器未被注意的额外压力升高。
⊙如果分析的是不易于转换的糖，那么就没有必要在流动相中使用EDTA_Ca，纯水需要过滤和脱气，如果要保持柱子适宜的性能，柱子的再生和流路的方向变化要经常进行。
保存条件（72小时以上不用时）
⊙关掉柱温箱，停泵。
⊙当柱子冷却后，从系统中移出，换上起初随柱子的堵头，柱子在保存过程中要防止挥干，通常的流动相都可作为柱子的适宜溶剂。在冰箱中5℃保存（不要冷冻），以防止微生物的滋生。
⊙柱子拆掉后要用不锈钢堵头装在系统上，冲洗整个液相色谱系统先用水，然后用甲醇，最后系统保存在甲醇中。
在关机后的重新启动
当开启带有一个柱很低的系统时，先打开柱温相升温，流速开始不要超过0.2ml/min。待系统在此条件下稳定至少二十分钟达到工作温度后再按通常的工作条件操作。
整夜的停机（放置少于72小时）
柱子留在系统中流速降到0.2ml/min，循环溶剂，将流出液管放入流动相瓶中，如果不想开着柱温箱，那就关掉泵和柱温让其冷却。
整夜停机后的开启
先打开柱温箱升温，流动相的流速不要超过0.1～0.2ml/min,保持此流速至少二十分钟直达到柱子工作所所需温度，然后再按照通常分析条件来设置。
故障检查
Waters SugarPak1柱是以树脂的膨胀形态紧密装填的，如果样品进行了很好的前处理，那么大部分产生的问题都和树脂填料有关，由于单向阀的损坏或是突然地反压增加，脆弱的树脂填料可能被泵的波动冲到柱子的后筛板处。反压的增加是否会发生，要经常检查在线过滤器以及保护柱中是否截留了微粒。如果不是此问题，那么很可能是树脂部分堵在了出口端的筛板处，检查这种情况是发生需要关掉泵，将柱子的流路方向反过来，然后泵流速开到0.1ml/min，20分钟达到工作温度后再设至工作时的流速。
柱子的再生步骤：
Waters SugarPak1柱的再生方法根据相关的样品纯度有不同的化，越是天然物，（尤其是含有那些重金属和过渡金属元素或是有机酸的样品）越需要经常地对柱子进行再生，因为它们会与柱子发生转换。
可以通过注射蔗糖来测试柱子的置换，如果蔗糖的峰有拖尾，那么柱子需要做以下处理：
1）配制500ml的再生溶液（500mg EDTA_Ca/L）；
2）把柱子流路方向反过来，在90℃下以0.5ml/min的流速冲洗一整夜；
3）再生之后回到正常方向使用。
当柱子反冲时，很重要的一点是需要保持溶剂的温度从而确保正确的冲洗，用冷的溶剂将会延缓冲洗的过程。

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