紫外可见分光光度计(UV)

主题:【原创】标样和样品的最大吸收不一致,您怎么办???

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不知有人遇到过样品浓度不同会导致最大吸收变化的情况,我就遇到过,现在还不知道怎么回事呢
hrcren
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还没遇到这种情况,但我估计呢,多半是因为样品中的杂质较多,杂质也产生了一部分吸收,导致了样品的吸收和标样的吸收不一致
savedown
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原文由 zhouyuhu 发表:


  标样中的成分比较简单,吸收峰受到的干扰少,而样品中的成分一般要比标样复杂,可能会存在和被测组分吸收峰发生重叠的吸收;再有,正是因为组成不完全一样,有时甚至差别还很大,所以使生色团和助色团受到的影响就不同,因此可能会使吸收峰波长的位移有所差异。至于是否可以接受,主要看对分析结果的影响大小、误差的大小和分析要求。

对分析结果的影响大小,怎么去判定呢???


对于这种现象要具体情况具体分析,影响因素可以分为:

1、溶剂效应
2、PH值影响
3、其他成键因素
4、混合物重叠出峰


如果是123的影响,那么注意校准,误差还不太大,毕竟只有3nm.
如果是4,那么可以肯定,误差将是显著的,甚至不能直接采用该种方法测量。
如果是4,一般用二阶导数光谱寻找最大吸收波长

对于相似度较高的重叠,二阶导的效果也很有限,反而会明显降低信号的信噪比。
cui-wei
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按照中国药典规定,最大吸收波长波动在±2nm以内是可以接受的,用最大吸收波长处结果来比较
jimmyho
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原文由 zhouyuhu 发表:
在具有波长扫描功能的分光光度计中,大家不妨做个试验,标样和样品的最大吸收经常不一致,一般相差正负3纳米,如果出现这种情况,是合理的范围内呢,还是不能接受呢?
  造成这种波长偏差到底是什么原因呢?红移,蓝移,还是别的什么原因,大家说说!!!


除了楼上各位提到的溶剂、共存物质干扰、化学反应(成键)等因素以外,我还想提醒各位注意待分析物的浓度。除了吸收强度以外,分析物浓度也可能影响其最大吸收波长(即使是其纯溶液样品)。这里有两种可能,其一是该物质自身为弱酸/碱,其浓度的不同可能影响电离情况,从而影响吸收光谱;其二是较高浓度时的分子间相互作用。当然,前者可以认为是后者的特例。
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