各家仪器所用的参数不同建立新的液质条件的步骤也会有些许差别,但总体应该大同小异吧。我说说agilent跟API的吧:
agilent6410 MRM优化步骤:
1、做全扫描scan,确认化合物的离子质量数;
2、做全扫描scan,优化毛细管出口电压(fragmentor),保证母离子的传输效率;
3、做子离子扫描(daughter ion scan),使用已优化好的fragmentor,选择定量离子,优化碰撞能量(collision energy),优化子离子的响应;
4、多反应监测MRM,使用已优化好的fragmentor和collision energy。
API4000优化步骤:
1、用SYRINGE PUMP 进样
2、用Q1 scan做大范围扫描,确定要分析的物质的m/z值 (peak Hopping)(time:1s)(step:1amu)
3、减小扫描范围(width=6amu),用Q1 scan确定母离子m/z并优化相关参数(profile)(step:1amu)(time:0.6s)
4、做product ion 确定子离子的m/z并优化相关参数 CE RAMP with MCA on
5、做MRM优化,确定最优参数(200ms) Quantitation optimigation
6、用FIA 做MRM方法中离子源参数的优化。
waters的没用过,欢迎谁来补充……
以上是具体的步骤,简单的讲就是1、先全扫描以确定母离子并优化参数使之最大;2、确定子离子并优化相关参数使之最大;3、做MRM。做这些参数的优化应该半小时足够,但是如果建立一个完整的方法还需要做LC的优化,如:流动相的选择、梯度的优化,一般如果有国标或是行标可参考那就比较快了,如果无标准可查那得需要一段时间了。
问题:你认为影响质谱灵敏度的最主要因素有哪些?
楼层上面已选!