紫外可见分光光度计(UV)

主题:【求助】分光光度计A值

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hongsedeyuner
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我们在做生化试验--小麦萌发前后酶活力比较实验的时候,把小麦中淀粉酶提取出来后,加3,5-二硝基水杨酸煮沸,再去测其吸光值。(具体实验步骤没详细阐述,但是按照规范操作)。
我们是要求在500nm时测其吸光值。以空白试液(蒸馏水)做对照,结果我们班绝大多数人的A值超过了1(干燥种子大约在:0.5~1,萌芽种子大约在1~1.5),只有两人稍微正常。我们实验老师说带了这么多年,没见过这种现象。各位能手帮忙分析分析吧!
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jun来也
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楼主的这个帖子发错版块喽!
可惜咱不会,要不然就直接回答得了。
几位版主都不在,劳驾巡视给转至相关版块去。
小柔
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原文由 hejun1984 发表:
楼主的这个帖子发错版块喽!
可惜咱不会,要不然就直接回答得了。
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偶8用做分析滴。。。帮8了你~
中国龙
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有专门的分光光度计版啊,那里很多专家啊
不过很多高手也喜欢来这里逛,呵呵


楼主的意思就是吸光度过大吧,不知道这些结果是用同一台仪器做的呢,还是几台仪器都是一样的?

如果很多仪器都这样的话,那可以排除仪器的原因了。

但是有老师指导,而且大家都这样,我觉得由操作错误引起的可能性也不大。

会不会是试剂的问题?比如某种试剂过期变质,或者发生了难以觉察的沉淀,导致吸光度过大。
hongsedeyuner
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原文由 wenxina 发表:
有专门的分光光度计版啊,那里很多专家啊
不过很多高手也喜欢来这里逛,呵呵


楼主的意思就是吸光度过大吧,不知道这些结果是用同一台仪器做的呢,还是几台仪器都是一样的?

如果很多仪器都这样的话,那可以排除仪器的原因了。

但是有老师指导,而且大家都这样,我觉得由操作错误引起的可能性也不大。

会不会是试剂的问题?比如某种试剂过期变质,或者发生了难以觉察的沉淀,导致吸光度过大。



我特意用了两台型号相同的仪器做对比,实验数据虽然略微有不同但基本差不多。3,5-水杨酸在配制过程中可能引起误差吗?或者提取酶液时混入了少量残渣?这些会引起误差吗?
zealot81
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原文由 wenxina 发表:
有专门的分光光度计版啊,那里很多专家啊
不过很多高手也喜欢来这里逛,呵呵


楼主的意思就是吸光度过大吧,不知道这些结果是用同一台仪器做的呢,还是几台仪器都是一样的?

如果很多仪器都这样的话,那可以排除仪器的原因了。

但是有老师指导,而且大家都这样,我觉得由操作错误引起的可能性也不大。

会不会是试剂的问题?比如某种试剂过期变质,或者发生了难以觉察的沉淀,导致吸光度过大。

很大的可能性
happy美丽
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做标准曲线了吗?如标准曲线正常的话,可以排除试药和仪器的原因,那剩下的,就是样品的原因了
yqgold
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原文由 dyann 发表:
做标准曲线了吗?如标准曲线正常的话,可以排除试药和仪器的原因,那剩下的,就是样品的原因了


另外,可能是酶失活不彻底吧?
liu999999
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可能是没有问题的。
LZ选用的种子品种较好,其酶活性可能较高的缘故。
nile6835
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换其他厂家的试剂看看,现在的很多试剂简直不敢恭维啊
yqgold
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原文由 nile6835 发表:
换其他厂家的试剂看看,现在的很多试剂简直不敢恭维啊


你是说3,5-二硝基水杨酸有问题吗?这可坏了,连样品都废了!
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