原文由 xiao_ru 发表:
称取粉碎后的样品2g(精确到0.05g)待测样品于50mL离心管中,加入5mL0.2mol/L盐酸溶液,和0.15mL2-硝基苯甲醛溶液,旋涡振荡~1min。避光置于37℃恒温水浴振荡器中过夜(约16hr)。
7.3 样品净化
待恢复至室温,加入5mL 4mol/L 磷酸氢二钠溶液,调节pH直至7.0~7.5,加入4mL乙酸乙酯,漩涡振荡~1min,4000r/min离心5~10min,取上层清液转移至10mL玻璃离心管管中;再加入4mL乙酸乙酯,漩涡振荡~1min,4000r/min离心5~10min,取上层清液转移至同一10mL玻璃离心管管中。在氮气氛围下,40℃吹干溶液。精确加入1.0mL甲醇水溶液(甲醇:水=5:95)溶解残留物,过0.45um滤膜,过滤后上机。
拿这个前处理的方法做面包糠,预裹粉等辅料,做到加乙酸乙酯离心后,会形成果冻状,乙酸乙酯层吸不出来?是什么原因呢?怎么解决?
做面粉会经常遇到的乳化现象啊,我以前也做过。这里面还有像鸡蛋、油脂等基质很复杂提取时很难的样品,对待这样的样品首先要知道是什么原因引起的,面粉的这类样品解决方案很简单,就是提高提取剂的量,一般最低是10ml提取,然后再像里面添加氯化钠和乙腈少许(以可以沉淀蛋白为止)。因为引起面粉类样品乳化的主要原因就是面粉中的蛋白问题。加氯化钠的目的主要是增大水相的极性利于乙腈的分离。在选择离心的时候最好是能在7000转/min以上。关于呋喃方面的检测我个人最近也在整理总结。这次就先说这些了