主题：【原创】一个液相色谱操作者的成长日记（更新至145楼）

原文由 emoc98311 发表:
吡啶甲酸铬的测定：

今天，我用NY/T 916-2004 标准测定饲料添加剂吡啶甲酸铬，按下面这个方法（从标准上截下来的）配制了标准储备液，

因为没做过，不知道吸光度高不高，就直接先进了标准储备液 ，结果却得到一个这样的色谱图（下图）。



开始只是以为仪器没平衡好，再进，可是连续3针都是这样。到底哪出了问题呢？1.标准没问题，新配置。2.检查了仪器正常。3.色谱柱上次用都好的，应该没问题。排除了这3点，还有什么呢？流动相？没错，照标准配置。我百思不得其解，不知道问题出在哪？难道是储备液浓度过高，可是高了也不会出现这个形状啊。我再仔细看了下标准，看到了做线性用取储备液后用水稀释，我稀释看下吧。再上仪器，结果出来了（见下图）。



一个物质在甲醇中溶解，后用水稀释测定，怎么会有这么大变化呢？我就继续用甲醇稀释做线性，结果还是跟第一个色谱图一样，乱！！！我现在都还不知道是为什么？希望能得解。

原文由 emoc98311 发表:
溶剂效应有这么厉害吗？

原文由 emoc98311 发表:
溶剂效应有这么厉害吗？

原文由 flyaway 发表:

原文由 emoc98311 发表:
溶剂效应有这么厉害吗？

当进样量大于10ul的时候，溶剂效应就会显现出来。

原文由 fengxuemei 发表:

原文由 emoc98311 发表:
拆单向阀：

由于样品量大，晚上仪器也在工作，下班之前就设置好了进样的序列且设置了自动停泵。第二天早上来，听到仪器一直在鸣笛报警，过去一看，原来是没压力了，流速也停了。我在仪器上检查了一下，原来是流动相走空了。明明设置了程序停泵，怎么没停呢？检查了下程序，发现是程序设置错误。我想流动相走空了，也没什么大不了，换上水，用仪器的程序灌泵吧。我换上水灌泵后，结果问题来了：发现没有废液排出来，压力也显示没压力。
因为仪器急着用，只好打电话问工程师了，得到了答案：这个现象通常都是因为气泡或是杂质进入了单向阀造成，这样我们就要拆开泵单向阀，把单向阀取出来,拆出来后把单向阀摇晃几下（能听见宝石的声音）或是超声再安装上去即可（注意方向）。照着工程师的方法，仪器问题很快就解决了。

天，原来流动相走空了还有这么多麻烦！
我们也经常没注意就让流动相走没有，如果单用一种流动相还好，泵会自动停下来；若果是混合流动相，而其中一种用完了，泵不会停，直接带着气泡走下去。等我们发现时，一般处理是：先关泵，再用注射器把管路中的气泡抽出来，在开泵，用流动相猛冲，直至把柱子里、检测器里的气泡冲出来为止（根据基线的状态来判断）。
这样做一般也没出过什么问题，仪器等平衡好还是很好用的。至于单向阀，从来没想到那头上~~~
不知这样对仪器有什么损害没有啊？版主可否指点一下？谢了啊~~~
我也是这样做的，因为没有出过别的错，一直以为这样就行的，不会有问题吧