主题:【求助】凉果蜜饯中甜蜜素结果的计算问题

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liugui
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最近实验室试做蜜饯中甜蜜素检测,在计算结果时,同事之间对计算过程有不同的看法,现提出请大伙讨论一下。

样品前处理:称取经剪碎的样品约4g(剪成米粒大小)于研钵中,加少量水浸泡10min后研磨至浆状,转移至100ml容量瓶中定容,不时摇动,1小时后过虑,以移液管移取滤液20ml于100ml具塞比色管,置冰浴中,加入5毫升50g/L亚硝酸钠溶液,5毫升100g/L硫酸溶液,摇匀,在冰浴中放置30min,并经常摇动,然后准确加入10ml正己烷,5g氯化钠,摇匀后振摇80次,静置分层后吸出己烷层于离心管中离心分离,取上清液进行GC分析。
同时带甜蜜素标准品试验,标准品浓度1mg/ml,体积3ml。

GC结果:样品及标准品各进样5次,每次进样1μl,取其峰面积平均值计算。
1号样称样量:4.0459g, 峰面积:181689
2号样称样量:4.0343g,峰面积:171650
标准品质量:1mg/ml×3ml=3mg,峰面积:60351

第一种计算方法:
1号样:A=3×181689÷60351=9.03mg
甜蜜素含量=9.03÷4.0459=2.23g/Kg
2号样:A=3×171650÷60351 =8.53mg
甜蜜素含量=8.53÷4.0343=2.11g/Kg

第二种计算方法:
样品质量:
1号样:4.0459÷100×20=0.8092g
2号样:4.0343÷100×20=0.8069g
1号样:
A=3×181689÷60351=9.03mg
甜蜜素含量=9.03÷0.8092=11.2g/Kg
2号样:
A=3×171650÷60351=8.53mg
甜蜜素含量=8.53÷0.8069=10.6g/Kg

上述两种计算方法,分歧在于样品的质量。第一种计算方法浆样品量直接计算,第二种方法对样品进行折算后计算,哪种计算方法正确呢?请做过甜蜜素的朋友来讨论一下。

另外,标准中“静置分层后吸出己烷层于离心管中进行离心分离,”,这里所说的“吸出己烷层”是将全部己烷层吸出,还是吸出一部分就行了?我做时是吸出一部分进行离心分离,因为振摇80次后产生的泡沫很难除去。
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萃取完成后,正己烷中目标物的浓度就是一定的,不管是全取还是取一部分,结果是相同的。
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