本人初做毛细管电泳，管子是永年的，最近用了50μm做，缓冲液硼砂PH9，处理时用的1MOL/LNaOH冲了40MIN，然后做但是基线很不稳定不知道为什么！是不是新管子一定要先用酸，再用碱处理迷茫中，今天换了75μm新管子，先用1当量的碱液冲洗40MIN，然后做，还是基线不平，而且电流到了100μV，迷茫啊！现在基线不稳的问题还不知怎么解决……有高手帮帮吧！

推荐答案：sunpengwjh回复于2009/10/22

建议用1M氢氧化钠冲洗后再用0.1M的氢氧化钠冲洗柱子，冲到基线基本平直，让后用水冲洗，最后用缓冲溶液冲，这样在用用试试！也可以参考我今天刚发的原创帖子《一些区带电泳毛细管柱子的处理方法》，仅作参考！

补充答案：

spying回复于2009/10/22

柱子处理有问题，只用1M的氢氧化钠冲了，应该还有缓冲溶液！

guocc007回复于2009/10/24

通微仪器公司的安装测试上是这么写的：
毛细管平衡顺序
甲醇冲洗5min，水冲洗2min；1mol/L盐酸冲洗5min，水冲洗2min；0.1mol/LNaOH冲洗10min，水冲洗2min；最后用缓冲液平衡15min。

cpudaxiao回复于2009/10/27

新的管子，还没有用过，先用浓碱冲，然后用0.1的碱冲，再用水，再缓冲溶液，这样下来的！
您是怎么处理的？处理后用起来效果怎么样？

甲醇-水-浓碱-水-弱碱-水-缓冲。水可选3-4min, 其它按个人习惯在5-10之间选择，缓冲不要少于15Min,效果还好。

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2009/10/22 16:33:04 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

柱子处理有问题，只用1M的氢氧化钠冲了，应该还有缓冲溶液！

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2009/10/23 9:59:30 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 sunpengwjh 发表:
建议用1M氢氧化钠冲洗后再用0.1M的氢氧化钠冲洗柱子，冲到基线基本平直，让后用水冲洗，最后用缓冲溶液冲，这样在用用试试！也可以参考我今天刚发的原创帖子《一些区带电泳毛细管柱子的处理方法》，仅作参考！

谢谢，今天找到原因了，是我样品处理的问题！感谢！！

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2009/10/23 13:31:40 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tobybabyholy 发表:
原文由 sunpengwjh 发表:
建议用1M氢氧化钠冲洗后再用0.1M的氢氧化钠冲洗柱子，冲到基线基本平直，让后用水冲洗，最后用缓冲溶液冲，这样在用用试试！也可以参考我今天刚发的原创帖子《一些区带电泳毛细管柱子的处理方法》，仅作参考！

谢谢，今天找到原因了，是我样品处理的问题！感谢！！

样品处理那里出现了问题？能否和大家分享一下！

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2009/10/24 15:38:40 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

1M的NAOH 冲40分钟明显是冲洗条件太强了，一般活化时也就5-10分钟，每天使用之前也就是冲2-3分钟就好了，并且如果不是分离蛋白就不建议在两次分离之间使用浓碱的。

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2009/10/27 13:31:30 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 sunpengwjh 发表:
原文由 tobybabyholy 发表:
原文由 sunpengwjh 发表:
建议用1M氢氧化钠冲洗后再用0.1M的氢氧化钠冲洗柱子，冲到基线基本平直，让后用水冲洗，最后用缓冲溶液冲，这样在用用试试！也可以参考我今天刚发的原创帖子《一些区带电泳毛细管柱子的处理方法》，仅作参考！

谢谢，今天找到原因了，是我样品处理的问题！感谢！！

样品处理那里出现了问题？能否和大家分享一下！

我的样品是标准品，用纯甲醇溶解，一个做过的师兄说不行，要用缓冲液去溶，还没有去做呢，这几天在提药材，想再重新处理一下管子，先冲一下，看看基线平不平，同时有个问题，标准品用纯甲醇溶不行吗？

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2009/10/27 13:34:41 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 guocc007 发表:
通微仪器公司的安装测试上是这么写的：
毛细管平衡顺序
甲醇冲洗5min，水冲洗2min；1mol/L盐酸冲洗5min，水冲洗2min；0.1mol/LNaOH冲洗10min，水冲洗2min；最后用缓冲液平衡15min。

这个……好像是进口柱子的处理方法，我用的是国产的，真便宜，不过也好，做不好就换一段，才几十块一米！

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2009/10/27 13:44:29 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cpudaxiao 发表:
1M的NAOH 冲40分钟明显是冲洗条件太强了，一般活化时也就5-10分钟，每天使用之前也就是冲2-3分钟就好了，并且如果不是分离蛋白就不建议在两次分离之间使用浓碱的。

新的管子，还没有用过，先用浓碱冲，然后用0.1的碱冲，再用水，再缓冲溶液，这样下来的！

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2009/10/27 13:52:29 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 tobybabyholy 发表:
原文由 cpudaxiao 发表:
1M的NAOH 冲40分钟明显是冲洗条件太强了，一般活化时也就5-10分钟，每天使用之前也就是冲2-3分钟就好了，并且如果不是分离蛋白就不建议在两次分离之间使用浓碱的。

新的管子，还没有用过，先用浓碱冲，然后用0.1的碱冲，再用水，再缓冲溶液，这样下来的！

您是怎么处理的？处理后用起来效果怎么样？

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