5.HILIC与质谱技术联用
HILIC可为强极性和强亲水性的化合物提供合适的保留。通过优化多个色谱参数,有利于实现目标组分和基质中干扰物质的分离,从而降低基质效应的影响;而含有高比例水溶性有机相的流动相又有利于提高质谱离子化效率,进而提高质谱分析的灵敏度。
质谱响应在某种程度上是取决于流动相中有机相的比例。采用ESI源时,毛细管中离子化的过程类似于一个电泳过程。由于毛细管被加高压,形成带电液滴。溶剂蒸发,离子向液滴表面移动,当液滴表面电荷产生的库仑排斥力与液滴表面的张力大致相等时,液滴会分裂成更小的液滴,对于半径<10nm的液滴, 液滴表面形成的电场足够强,电荷的排斥作用最终导致部分离子从液滴表面蒸发出来,形成了
气相离子。而有机相的表面张力比水相的表面张力小得多。因此,在相同的条件下,流动相中有机相的比例越高,质谱的响应越高。从图4可以看出,在HILIC柱上的响应比在RPLC柱上的响应高出十倍左右。
Figure 4. Chromatograms comparing the retention and MS response of analyte on C18 column and HILIC column. (A) Column: 2.1×50mm, 3 m Inertsil ODS-3; mobile phase: methanol-water containing 0.2% formic acid (15:85, v/v) (B) Column: 2.1×50mm, 1.7 m ACQUITY UPLC BEH HILIC; mobile phase: methanol-water containing 0.2% formic acid (85:15, v/v)