主题：【分享】EP2.6.12/13中文翻译版本，如有不对的望各位指点。

4.4产品的检测
4.4.1薄膜过滤法:
薄膜过滤用的薄膜孔径不超过0.45um,其截取细菌的有效性经过确认。在选择滤膜材质时，应确保供试品不影响细菌过滤或截留的的有效性。一种微生物使用一个薄膜过滤器。
吸取按照规定方法制备的样品溶液适量，（一般都取相当于1g的样品溶液，如果预知细菌数量较多的情况下也可以吸取更少量的溶液）每个样品迅速过滤制备二个滤膜片，每个滤膜器都用大约100ml的适当液体，如pH=7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液清洗三次。在溶液中，可以加入表面活性剂聚山梨酯80或抗微生物的灭活剂。如果通过验证，清洗次数也允许少于3次。对于总需氧菌的检测，将一个薄膜置于大豆酪蛋白胰消化物琼脂培养基上进行培养，培养温度为30℃～35℃,培养时间为3～5天。对于霉菌和酵母菌总数的检测，将另一薄膜置于沙氏葡萄糖琼脂培养基上进行培养，培养温度为20℃～25℃，培养时间为5～7天。
选择那些菌落数小于100的平板进行计数，并计算每克或每毫升的菌落数（CFU/g,或CFU/ml）。
4.5平皿法（倾注法）
4.5.1：取供试液1mL,置于9cm培养皿中,每一个稀释水平的每一种培养基制备至少两份平板，加入15ml～20ml适合培养细菌的大豆酷蛋白胰酶消化物琼脂培养基，培养温度为30℃～35℃,培养时间为3～5天。加入15ml～20ml ml适合培养真菌的沙氏葡萄糖琼脂培养基，培养温度为20℃～25℃，培养时间为5～7天。琼脂熔化温度不超过45℃选择一个溶液平板计数，平板计数选择小于250的总需氧菌菌落数的稀释级平板，选择小于50的霉菌和酵母菌菌落数的稀释级平板，计算出每克或每毫升产品的平均菌落数（CFU/g,或CFU/ml） 。
4.6培养基的有效性和计数法的正确性
让试验细菌株分别在含有适宜液态培养基（例如 肉汤介质A）中生长，温度在30℃~35 ℃，生长时间为48小时。让试验真菌株分别在含有适宜液化培养基（例如无抗生素的介质C）中生长，白色念珠菌在20℃~25℃生长48小时，黑曲霉菌要在20℃~25℃生长7天 。
金黄色葡萄球菌              例如ATCC 6538 (NCIMB 9518,CIP 4.83)
大肠杆菌                    例如ATCC 8739 (NCIMB 8545,CIP 53.126)
枯草芽孢杆菌                例如ATCC 6633 (NCIMB 8054,CIP 52.62)
白色念珠菌                  例如ATCC 10231 (NCPF 3179,CIP 48.72)
黑曲霉菌                    例如ATCC 16404 (IMI 149007,CIP 1431.83)
用pH=7.0的氯化钠蛋白胨缓冲液制备，每毫升含有约100个菌落（CFU）菌悬液。
在有无待测产品的情况下，都要用每个微生物的菌悬液作为一种验证计数方法。
当用膜过滤法或平板计数法测试时,任何微生物从接种得到的验证试验不得超过五代,。

4.7结果的解释    
细菌的计数以在大豆酷蛋白胰酶消化物琼脂培养基上显示的平均菌落数(CFU)为准,如果在大豆酷蛋白胰酶消化物琼脂培养基发现了真菌，也按总需氧菌计数。真菌的计数以在沙氏葡萄糖琼脂培养基上显示的菌落数(CFU)为准,如果在沙氏葡萄糖琼脂培养基上发现了细菌，也按真菌计数。

4.8大肠埃希氏菌
将待测样品按前述4.3的方法进行处理，将10ml或相当于1ml（1g）样品量接种至100mL
肉汤培养基A中，混合均匀后在35℃~37℃下培养18~48h。振荡容器，将样品混合均匀，将1mL样品移液至100mL肉汤培养基G中，在43℃~ 45℃下培养18-24h。在琼脂H平皿中在35℃~37℃的情况下按18~72小时进行传代培养。长出的红色的、非黏性的革兰氏阴性杆菌表明存在大肠杆菌。还可以用合适的生化试测进行确认，例如生成吲哚(通过滴加几滴靛基质试液,液面呈红色, (靛基质阳性)进行确认)。如果不可见此类菌落或证实性实验呈阴性，则产品该测试项合格。
4.9 溶液和培养基配制
下列的溶液及培养基可满足测试中按照药典对微生物污染方面的要求。
4.9.1 pH=7.0的氯化钠蛋白胨缓冲溶液:
磷酸二氢钾          3.6g,
磷酸氢二钠          7.2g,
氯化钠              4.3g,
蛋白胨（肉或酪蛋白）1.0g,
纯化水              1000ml
用验证过的方法灭菌。

4.9.2大豆酪蛋白胰酶消化物肉汤）
大豆酪蛋白胰酶消化物  17.0g
大豆粉木瓜酶消化物    3.0g
氯化钠                5.0g,
磷酸二氢钾            2.5g,
单水合葡萄糖          2.5g,
纯化水                1000mL，
调节pH值在灭菌后25℃时pH为7.3±0.2，用验证过的方法灭菌。
4.9.3大豆酪蛋白胰酶消化琼脂
大豆酪蛋白胰酶消化物      15.0g,
大豆粉木瓜酶消化物        5.0g,
氯化钠                    5.0g,
琼脂                      15.0g,
纯化水                    1000mL
调节pH值在灭菌后25℃时pH为7.3±0.2，用验证过的方法灭菌。
4.9.4沙氏葡萄糖琼脂培养基
动物组织的胃蛋白酶消化物和酷蛋白的胰酶消化物的混合物（1：1）  10.0g
水合葡萄糖                  40.0g
琼脂                        15.0g
纯化水                      1000ml
调节pH值这样在灭菌后25℃时pH为5.6±0.2，用验证过的方法灭菌。

不知道仁兄有没有后续的翻译，有的话请继续，或者mail到chn_tiger@hotmail.com，跪求！！！