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液相色谱（LC）

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主题：【求助】急急！！检测器响应值与设定的波长有关吗

浏览0 回复13 电梯直达

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yufang_1234

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2010/3/4 12:47:09 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 xky0230699(xky0230699) 发表:
停泵扫描有时有很大的误差，要等泵的液相完全停止后再扫描，且要多扫描几次，扫描结果应与停留在检测池中的样品溶液强度对照。

我扫了打给有十次都是最大吸收再194nm 次吸收在246nm 不过次吸收很小

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有水有渝

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ID：xky0230699

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2010/3/4 16:28:40 12楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

把你的扫描图发一个上来看一下？

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微雨燕双飞

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2010/3/4 16:50:24 13楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

先生/小姐，我在你发的另一个帖子上回复过你了，再陈述一遍：
使用HPLC-UV分析时，建立一个方法首先要对化合物进行光谱扫描，了解它在紫外-可见区的吸收情况，如您所说，它在194 nm和246 nm有两个吸收峰，通常情况下应选择吸收峰处的波长作为液相的检测波长，然而194 nm属于远紫外区，大多数化合物包括流动相在这里都有较高吸收(至于为什么，这涉及到分子结构以及价键跃迁，我就不细说了)，基线噪声和漂移严重，分析灵敏度反而不高，所以应选择其他波长。但242 nm未必是您最佳的选择，因为其他波长虽不是吸收峰，但某些波长下的吸收未必就比242 nm低，比如拿泰山和珠穆朗玛峰比，虽然泰山是山峰，但珠穆朗玛峰的山腰未必比泰山低。所以225 nm虽不是吸收峰，但它照样可以比242 nm的吸收高。选择波长不能单纯地看吸收强度，同时还要考虑基线噪声的高低。通常情况下，您可以从205~242 nm之间5 nm低增大，分别分析(恒定其他一切条件)，计算信噪比(S/N)，信噪比最高的那个波长就可以作为测试波长。以后分析时也如此。当然化合物所有吸收峰处于230 nm以上时可以不必如此。

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Last edit by godblesschina