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液相色谱（LC）

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主题：【原创】不同色谱柱对同一供试液分离情况的比较

浏览0 回复11 电梯直达

睿武孝文

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发表于：2010/04/07 12:18:54 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

以下两个色谱图是用同一供试液在同一台液相上，用不同的柱子（均为C18柱）得到的。
以对照品比对，各图中的峰都与相应的对照品保留时间相同，但峰面积相差很大。

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2010/4/7 12:21:39 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这个是正常现象，色谱柱之间差别是挺大的。第二张图分离度比第一张好

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有水有渝

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2010/4/7 12:26:12 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

不同色谱柱就是这样，只是峰面积和保留时间有小差异还有比较性，我分析一个喹啉类混合物，同是反相柱规格一样，只是品牌不一样，出峰顺序都不同了。

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2010/4/7 12:26:38 Last edit by xky0230699

睿武孝文

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2010/4/7 12:43:47 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:
不同色谱柱就是这样，只是峰面积和保留时间有小差异还有比较性，我分析一个喹啉类混合物，同是反相柱规格一样，只是品牌不一样，出峰顺序都不同了。

我倒不在乎出峰时间的变化，这是挺正常的，即使同一根柱子，平衡时间不同，保留时间有差异。
我的疑惑是，我认为色谱柱仅起到分离的作用，与峰面积应该没有关系，检测器与峰面积有关。
所以，虽然用了两根不同的柱子，因为在同一台液相上做的，对于同一个样来说，其相应峰面积应该是相同的。
所以我就怀疑，是不是对于上图来说，后面跟着峰到下图后没分开啊。

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applewwy

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2010/4/7 13:17:10 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

第一张图分离度不行啊。

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微雨燕双飞

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2010/4/8 17:15:45 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我觉得第一张图测试时，基线未平衡好，这样得出的结果对于第一款色谱柱不太公平。还需要多做一下测试，从两款色谱柱中分别挑出最好的进行对比。

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1818

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2010/4/9 16:20:57 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

很正常啊!!有些品种对色谱柱的要求是很高的,况且色谱柱之间本身就存在着较大的区别,用这根柱子分不出来的东西或许换个品牌的柱子就OK了!

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哇咔咔

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2010/4/9 16:32:58 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 睿武孝文(chaifayong) 发表:
原文由 欧冠+世界杯(xky0230699) 发表:
不同色谱柱就是这样，只是峰面积和保留时间有小差异还有比较性，我分析一个喹啉类混合物，同是反相柱规格一样，只是品牌不一样，出峰顺序都不同了。

我倒不在乎出峰时间的变化，这是挺正常的，即使同一根柱子，平衡时间不同，保留时间有差异。
我的疑惑是，我认为色谱柱仅起到分离的作用，与峰面积应该没有关系，检测器与峰面积有关。
所以，虽然用了两根不同的柱子，因为在同一台液相上做的，对于同一个样来说，其相应峰面积应该是相同的。
所以我就怀疑，是不是对于上图来说，后面跟着峰到下图后没分开啊。

峰面积对于不同柱子，由于分离度和柱效不同，有可能造成面积不一样。有的柱子峰分叉，有的柱子很好。有的柱子甚至于出峰顺序都会改变。不过变化时对照和样品峰面积都会发生变化，但是最后计算含量是一样的。所以单从峰面积来说是不准确的，也是不太正确的。
如果确认第一张图，后面有杂质的话。第二张图有没有包杂质，可以用DAD做个立体验证看下。

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