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紫外可见分光光度计（UV）
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主题：【求助】植物黄酮提取的问题

浏览0 回复4 电梯直达
single2015
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发表于：2010/04/12 15:18:43 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
准确称取于120℃干燥至恒重的无水芦丁(作黄酮标准对照)9.5 mg,用60%的乙醇定容于50mL容量瓶中,摇匀,得到浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,作为贮备液备用。准确量取此液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 mL于25 mL容量瓶中,分别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,分别用30%的乙醇稀释至刻度,混匀,放置16min。用紫外分光光度计在510 nm处测定吸光度。

如上述显色实验，为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液，而不是其他浓度（多少浓度范围内遵循朗伯比尔定律？）。别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,  显色原理是什么，各溶液用量有什么要求？ 各溶液用量之间是否有内在关系？  显色时间有什么要求？  还有就是混匀,放置16min  为什么要放置16min？如何放置？在容量瓶中放置？容量瓶塞需打开还是塞上？
还有就是在做实验中  植物黄酮提取，显色后，进紫外分光光度计测量时，分光度总是跳动不稳定。老师说需离心，究竟离心的目的是什么？难道是沉淀
Al(no3)3?  不过离心后  含试样的溶液 会有好多沉淀，而参比液几乎没有沉淀，沉淀是什么物质，是否含有大量黄酮类物质，从而影响实验准确度？
  究竟 如何解决A值跳动的症状（紫外分光光度计没问题）？
还有就是显色溶液是否要现用现配，是否用量，及其浓度都要精密控制？
  还有就是吸光度测量的重复试验，每份重复三次，指的是需重新取样提取黄酮物质，再显色测吸光度，还是显色过后，取试液与三比色皿中，测量三次吸光度？
  还有就是稳定性实验，为什么要做？

我是一名学生，刚刚入手实验，有很多不明白的地方，请各位前辈不吝赐教，
还有就是想各位前辈能给些此类光谱测定的参考资料及经验，十分感谢！
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2010/4/13 11:04:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
怎么没人回答？？？希望各位不吝赐教啊~~
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yongw
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2010/4/13 11:08:43 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有可能是离心的转速不够，溶液里面有杂质
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musashino
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2010/4/14 11:11:09 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我做的跟你一摸一样
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2010/4/20 20:11:08 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢各位的回答
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