主题：【在线讲座33期】液相色谱柱使用疑难问题解析(答疑结束）

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
plexu您好：
为什么色谱柱保存在100%的乙腈当中不好，有些文章上说纯甲醇保存也不好，20%的水相比较好，这是为什么呢？

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
plexu您好：
为什么色谱柱保存在100%的乙腈当中不好，有些文章上说纯甲醇保存也不好，20%的水相比较好，这是为什么呢？

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
plexu您好：
为什么色谱柱保存在100%的乙腈当中不好，有些文章上说纯甲醇保存也不好，20%的水相比较好，这是为什么呢？

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 jie1ming2(jie1ming2) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，请问：
近期我们采购了十几根月旭柱子，可否将Ultimate、XtimateT等系列柱子的适用于何种分析，适用于何种流动相？详细解释一下，毕竟刚刚开始试用，还不是特别熟悉柱子的性能。
象cp药典氯霉素、地塞米松磷酸钠、克拉霉素建议用什么柱子？如果流动相含有高氯酸钠建议试用什么系列的柱子？
谢谢。

非常感谢对月旭产品的信任。

月旭的Ultimate系列柱子中有正相柱、反相柱、HILIC柱、离子交换柱、手性柱、PAH专用柱、氨基酸专用柱和聚合物基质柱等等，适用的流动相都不尽相同，不知你购买的是什么类型的柱子？希望你尽快和月旭的技术支持部门取得联系，你会得到非常周到的服务。
月旭的Xtimate系列产品，是聚合物涂覆的硅胶填料，主要特点是在保持硅胶基质柱效高、选择性好的同时，又克服了普通硅胶基质不能很好耐碱的弱点。Xtimate系列产品的pH应用范围是1-12.5，可以大大拓宽色谱方法的灵活性。对一些碱性的易电离的分析物，就可以通过调高流动相的pH来抑制碱性物质的电离来增加在反相色谱中的保留能力，而免去了加离子对试剂或三乙胺扫尾剂的麻烦。

你列的几种物质，药典上应该都列了所用色谱柱的类型，你可以按照药典的推荐类型，选择月旭的相应柱子。譬如药典上说用C18，如果是普通的色谱条件，选Ultimate XB-C18和经济型的Welchrom C18即可。如色谱条件特殊，如色谱条件pH2以下的，选月旭的Ultimate LP-C18；色谱条件是pH9以上的，选择Xtimate C18；如果流动相中水相含量超过95%的，考虑从Ultimate AQ-C18、LP-C18或者Xtimate C18中选用。

原文由 gaoxiaoyexian(gaoxiaoyexian) 发表:
plexu您好：
    你在色谱柱保存里面有提到“CN基柱在有机极性溶剂中柱床不稳定（会导致柱床结构坍塌），适合在水相中低温保存。低温保存要确保不发生固定相冻结而损坏柱床”
    我有以下问题想请教:
    1。“水相”指的是什么？纯水？
    2。我们实验室的CN基柱保存在40%的乙腈里面，这个有不良后果吗？
    3。CN基柱应该怎样维护才好呢？比如做完实验用什么流动相冲柱子、短期用什么溶剂保存、长期用什么溶剂保存等等。
    先谢啦！！

原文由 littleaimar(littleaimar) 发表:
公司的一个产品前段时间换成月旭的氨基柱检测，开始的时候分的非常好，特别是两个我们平时很难分开的杂质，但是用不了多久就分不开了，最后所有的峰都前伸的很明显，不知道何故？对于氨基柱的使用和维护，PLEXU你可以给出一些指导性的意见吗？前面有人说的氨基柱在水相比例大的环境下氨基容易解离，可以阐述下具体的机理吗？谢谢
总之，个人感觉这个在线讲座是举办来最实用的一次，希望以后这样的讲座多多益善，大家共同进步！

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
plexu您好：
为什么色谱柱保存在100%的乙腈当中不好，有些文章上说纯甲醇保存也不好，20%的水相比较好，这是为什么呢？

保存在纯甲醇或纯乙腈里，其好处是可以最大限度避免硅胶基质和键合相在保存期间的水解。其缺点在两方面，一是纯有机溶剂容易挥发使柱床变干（不过这个缺点也不明显，只要堵头塞得很紧，保存个几个月甚至半年以上都不会有柱床变干的问题）；二是纯有机相保存对已经水解暂时吸附在填料上的键合相洗脱能力强，又容易加快键合相的流失进程。签于上述原因，也有建议将色谱柱长期保存在80%浓度的甲醇水或乙腈水溶剂中。

原文由 plexu(plexu) 发表:

原文由 风的海洋(wphlr) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教：

我在做方法开发的时候,用乙腈和水作为流动相,在调整梯度的时候发现,刚开始用60%乙腈, RT为2.5分钟,调到40%乙腈,RT没有变化,30%也没有变化,一直调到20%的时候,RT突然变到了约13分钟,请问这是什么原因?我用的是离子交换柱.

离子交换柱的保留时间主要由洗脱液的离子强度和pH决定，你现在讲的比较简单，需要把你的方法说的详细一点才能做具体的分析。譬如分析物是什么情况，其含有极性电离基团和非极性基团是什么性质？离子交换柱是聚合物基质还是硅胶基质？水相是什么缓冲盐？

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:

原文由 xue2009(xue2009) 发表:

原文由 zxm-1980(zxm-1980) 发表:
plexu您好！我有以下问题想请教，
请问：我们有一台waters1525色谱仪，最近基线总是呈现波浪形很有规律，波长越小越明显，梯度洗脱时向上飘逸而且后一段时间呈现波浪形，很影响分析，我想问一下，是不是柱子的原因，用的是C18上海安普的？麻烦了1

你看压力稳定不？我估计很有可能是柱子的问题，柱子里面有强保留性物质，建议先把柱子清洗干净，用甲醇或者异丙醇冲洗，不接检测器。

您好！我换了一根新柱子可还是出现上述情况，请问还有哪些原因能够造成上述情况，能给解析一下么？谢谢，各位操作液相色谱的没出现过上述情况么？[/quote
我在用液相时也经常遇到这种问题，后来仪器工程师说可能是氘灯问题，后来换了新灯，暂时没有出现相同问题，