主题:【求助】液相,柱子挂不住样品

浏览0 回复17 电梯直达
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kylabs
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原文由 tubaobao8687(tubaobao8687) 发表:
原文由 kylabs(kylabs) 发表:
加什么酸?越加酸,电荷越多。
这种容易带电的,肯定要用特殊的柱子。


可否有具体的建议,不升感激!!


这种胺类的化合物,要么加酸,同时加离子对试剂,形成中性物,用C18柱做。
要么就是特殊的亲水柱,在酸性条件下带电,不加离子对试剂,条件可以和LC/MS兼容,比如说这三种胺类:

柱子:Cogent Diamond Hydride™, 4µm, 100A
流动相:A: DI water + 0.1% formic acid
                B: 90% acetonitrile + 0.1% formic acid + 0.005% TFA
梯度:Gradient:
Time%BTime%B
0.01009.085
5.010010.085
6.09512.070
7.09512.1100
Post Time5 min.
Flow Rate0.4 mL/min.
SampleSynthetic human urine
Peaks1. L ?Arginine 175 m/z RT = 12.83 min
2. L ?Lysine 147 m/z RT = 13.49 min
3. L - Histidine 156 m/z 14.42 min
DetectionESI -pos - Agilent 6210 MSD TOF mass spectrometer
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2011/5/28 18:06:30 Last edit by kylabs
19811128
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实在不行的话就用正相柱,不过也可以用一些特殊的色谱柱,相HILIC柱不防试一下
tubaobao8687
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谢谢各位,我昨天做了,用C18的柱子,不管是加TFA还是加磷酸氢钠都还是不出峰。最后我是用C8柱跑出来的。还是要谢谢各位
glowyouth
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为什么不考虑一下正向柱子做呢?可以用正向流动相做!
1818
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seeker
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楼主:你样品的极性太强(有2个氨离子),不加离子对,用C18肯定是无法保留的( C18是非极性),所以出峰会很快。对于这种化合物的液相分析,有三种解决方法:
  第一种:还是使用C18,流动相添加十二烷基磺酸钠,增强保留。
  第二种:采用 PC HILIC 色谱柱,也被称为“反反相”色谱柱,特别适合分析强极性样品,比如河豚毒素这类强极性物质也能够出峰很漂亮。
  第三种:直接用离子色谱柱,如 强阳离子交换法-磺酸基。
 
  以上是我个人一些见解,希望能对你有所帮助
有水有渝
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原文由 tubaobao8687(tubaobao8687) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
加入磷酸缓冲盐试试,还可以使用离子对色谱法。


谢谢!!!我试试  另外我想再问一下,加磷酸一氢钠和磷酸二氢钠有什么区别吗?


如果后面经过磷酸调节到相同PH的话, 这个差别很小,都可以使用。
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2011/6/4 9:18:29 Last edit by xky0230699
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