主题:【原创】选购离心机时注意事项

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lab800
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离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强大的离心力,加快液体中颗粒的沉降速度,把样品中不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。所以需要利用离心机产生强大的离心力,才能迫使这些微粒克服扩散产生沉降运动。

首先,要确定你的模板DNA的浓度大概是多少,太稀和太浓都会影响PCR结果,具体数据记不清了,只是我自己跑PCR时因为浓度问题失败了很多次,通过多次调整浓度才得到比较理想的结果。

其次,如果是自己提的DNA,要确保模板中没有酒精(提DNA最后一步,一定要等酒精挥发完才能加TE

最重要的是要探索一个好的退火温度,退火温度的高低可以以0.5的梯度变化确定,假如参考值为61,先跑一次,看结果,如果拖尾很长,则一个一个梯度增加退火温度,但不能增得太急,我那时次增加5,结果跑出来全是很小很小的片段,大概都只有300bp了。

这是我跑PCR的一些经验,仅供参考谢谢。


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PCR是什么东东?


Polymerase Chain Reaction
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还是请专家翻译成中文吧,毕竟我们都是中国人,而且好多板油们也把好多单词给遗忘了
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