实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8111161今日发帖：57 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
PCR
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【分享】确定PCR循环数的一点方法

浏览0 回复2 电梯直达
省部重点实验室
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2012/05/05 12:00:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
确定循环数的基本原理是: 产物能够保证你进一步分析操作的最小循环数.因为过多的循环
数容易造 成ERRORS和非特异性产物的积累 产物的量不够, 优化的方法有:


1. 增加TEMPLATE

2. 增加循环数

 
如何确定循环数,有一个方法.

做一个PCR体系,40循环,50ul, 分别在20,25,30,35循环时从体系中取5ul,一起跑电泳分析

.从而确定最佳的循环数


另一个会影响PCR特异性的是PCR cycling时在两个温度间变化的速率(ramping rate).当然
是越高 越好.不过咱们大部分条件有限,就那么几台PCR仪,也没有多少挑选的余地
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: PCR 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
wyj-1987
wyj-1987
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/7/24 14:00:36 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常感谢！！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
diameter32
diameter32
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/8/10 21:23:25 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不错的方法哦，谢谢
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 确定PCR循环数的一点方法
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁