主题:【求助】HPLC图谱中出现鼓包

浏览0 回复16 电梯直达
hmhcpu
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原文由 pandora98(pandora98) 发表:
1.样品中含两个组分,其中一个组分极性很大,在酸性流动相中以离子形式存在,没有保留。所以图1中在死体积位置出峰。
2.在醋酸氨溶液中,极性很大的组分依然保留较差,在死体积之后紧跟着系统峰,但是因为溶剂效应,该物质表现为一个鼓包带一个小峰。尝试用大比例的水稀释样品可以解决这个问题。


应该只有一个组分才对的。我们初步判断,是因为化合物在酸性条件下不稳定,存在一个化学平衡方程式,产生了新物质,所以会在死时间处出峰。
您的意思是鼓包可能是因为溶剂效应 才不是以一个正常的色谱峰出现?我会尝试用大比例的水来稀释样品。
谢谢
jiuhuakeli
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sally0326
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有水有渝
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原文由 hmhcpu(hmhcpu) 发表:
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
检测波长是多少,分析的是纯品还是其它样品?首先可以确定组分在你的前处理过程和两种流动相中是稳定的吗,均是等度洗脱吗,感觉上是流动相没有选择正确,可能受PH影响比较大,再调试一下,由于不知道组分的理化性质,难以提出什么建议。


检测波长是210nm,样品是纯品。现在我们分析到,样品在酸性条件下,存在一个化学平衡的现象,所以会出现两个色谱峰,因此我们准备放弃酸性的流动相体系。我们又尝试了不同pH的流动相体系,结果是这样的:pH=4时,结果与甲酸的图谱类似;pH=5和7时,都有鼓包,且pH=7时的鼓包形状与pH=6.2时一致,与pH=5时不一致(因图谱上传不上去,我只能文字描述)。希望指教,谢谢!


为什么不用PH3.0或PH2.5试试?
liufeilzu
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化合物是盐,而且在不用ph下有不同解离度,楼主已经用普通ph溶液试过(这个很好)建议ph到最低2,看一下。
对你包的解释:1检测波长是210,大部分盐和酸会有吸收,如果你的盐酸盐不是很纯净,比如溴离子等会有峰扩展,包的出现。
2解决方法是抑制解离,不让盐酸盐分离或者完全分离,如果ph不合适会出现二者混合就是双峰
该帖子作者被版主 zhaohua80112积分, 2经验,加分理由:鼓励应助
zhaohua8011
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