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液相色谱（LC）
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主题：【求助】高效液相色谱的峰分不开

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云萧雨霁
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发表于：2013/03/08 13:06:07 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我是做苦碟子的腺苷，用了不同时间提取，昨天测得40min的峰就可以分开，而今天超声了20min峰就分不开了，是什么原因，流动相：甲醇-水（12:88），C18柱，260nm，1ml/min，还有昨天进样品的第一针也分不开是什么原因啊？有什么方法可以解决吗？谢谢啦！
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jncxyy2012
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2013/3/8 15:00:45 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一针没分开，也许是系统没平衡好；超声时间太长是否发生反应。
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云萧雨霁
v2676087
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2013/3/8 15:54:56 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
现在是用的40min的，前面有一个峰与我要的峰分不开了，后面的峰分开了
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lwy1988
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2013/3/12 10:31:22 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1，流动相比例
2，色谱柱
3，系统平衡，温度等
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xzy0513
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2013/3/13 20:19:28 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人感觉还是系统平衡的时间不够。前段时间我也遇到过类似问题，延长的6分钟的平衡时间久解决问题了。
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有水有渝
xky0230699
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2013/3/14 8:33:51 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两次提取的时间不同，进样后保留时间有明显变化吗，分不开的那两峰的峰高有没有明显变化？
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柏坡
hgycook
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2013/3/14 11:21:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
两种物质结构相近极性相近就容易分不开，还与色谱系统的状态有关，柱效问题等，超声处理是个破坏过程。
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哇咔咔
feixue810316
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2013/3/19 10:01:30 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没做过，但从你的流动相条件来看，有机相比例已经很低了，可以考虑在水相中加些缓冲盐来改善分离效果。如果分离度不高的话，耐用性上面也很难过关的
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xiaowang268
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2013/3/19 18:29:38 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
每次进样前，要保证系统已达到平衡，最好连续进两次，看看重复性怎么样
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xiaowang268
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2013/3/19 18:32:47 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以试试调一下流动相比例啊
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云萧雨霁
v2676087
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2013/3/21 19:34:37 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢大家了。
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