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主题：反向C18色谱柱可以进酸性流动相吗？

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zhaohua8011
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2014/3/25 16:20:04 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
常规反相色谱柱能耐受的pH范围是2-8！常用磷酸，冰醋酸！
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三人行
jncxyy2012
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2014/3/25 21:48:22 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhoujin83(zhoujin83) 发表:

现在一般的C18色谱柱，能耐受的pH范围是2-8，也有范围更宽的，可以参照色谱柱说明书。所以流动相中添加磷酸、甲酸、乙酸什么的都没有任何问题，只要pH在耐受范围即可。但是，选择流动相添加剂也是有讲究的，比如你方法选用的波长是210nm，那么最好不要用甲酸乙酸，因为甲酸乙酸的截止波长大于210nm，会造成基线漂移严重；另外，如果你流动相的pH是4.0，那么不建议使用磷酸盐，因为磷酸盐/磷酸在pH4.0附近是没有缓冲能力的，流动相的pH很容易发生变化，导致出峰重现性差。


用磷酸氢二钠或磷酸氢二钾/磷酸也可以起到很好的缓冲效果。
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三人行
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2014/3/25 21:50:09 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 donglixian(donglixian) 发表:
酸性大写没事，我正常用5%硫酸冲柱



是什么特殊的柱子？
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弘和
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2014/3/26 14:14:16 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 向日葵的忧伤(v2768331) 发表:

要分析的样品是弱有机酸类物质，流动相需要酸性，请问磷酸、乙酸、甲酸等，哪个适合做C18色谱柱的流动相，浓度或者pH值多少合适？


一般酸性在2~7之间，用三氟乙酸，醋酸
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弘和
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2014/3/26 14:16:26 15楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般柱子耐酸性是在2-7之间，加点三氟乙酸，醋酸都可以
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nixiaolong
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2014/3/26 15:48:56 16楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以，一般的柱子pH不要低于2，如果耐酸柱子还要更低一些
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2014/3/26 22:38:57 Last edit by jncxyy2012
zgylucky
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2014/3/26 17:56:34 17楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
pH一般2以上，低于2对硅胶基质的柱子会有影响
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三人行
jncxyy2012
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2014/3/26 22:42:52 18楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在选择缓冲液pH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个pH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰。
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hujiangtao
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2014/3/27 9:34:28 19楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱子一般都是耐酸的，硅胶的不耐碱
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向日葵的忧伤
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2014/3/27 13:32:18 20楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 弘和(v2832378) 发表:
原文由 向日葵的忧伤(v2768331) 发表:

要分析的样品是弱有机酸类物质，流动相需要酸性，请问磷酸、乙酸、甲酸等，哪个适合做C18色谱柱的流动相，浓度或者pH值多少合适？


一般酸性在2~7之间，用三氟乙酸，醋酸


进了醋酸，柱子是不是要用纯水和甲醇洗呀？
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