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液相色谱（LC）
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主题：【求助】液相色谱大神们，跪求一个关于色谱强度的理论问题

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moshanghuakai
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发表于：2016/03/27 15:55:59 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果我化合物的摩尔吸光系数是13600，那么100um的样品，进样5ul，我流通池的体积是500nl, 光路是10mm, 那我这个化合物大概的峰高或是峰面积是多少？我说的只是估算，并不要求精确。
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moshanghuakai
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2016/3/27 15:58:23 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
神们都在休息吗？看到一定要帮帮我啊。
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lhy86725
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2016/3/27 16:55:59 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
A=KBC，A跟面积、高度等成正比，不过你问的没意义，灵敏度、衰减等都会影响面积，高度等数值，
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moshanghuakai
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2016/3/27 19:39:19 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lhy86725(lhy86725) 发表:
A=KBC，A跟面积、高度等成正比，不过你问的没意义，灵敏度、衰减等都会影响面积，高度等数值，
所以我问得是估算方法，而不是准确的应该是多少啊。朗博比尔定律是这样的，有摩尔吸光系数，应该就可以粗略计算啊。
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武灵
zhonghuashendun
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2016/3/27 19:59:55 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有几个单位是错的？看不懂。
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lhy86725
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2016/3/28 8:45:09 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 moshanghuakai(moshanghuakai) 发表:
所以我问得是估算方法，而不是准确的应该是多少啊。朗博比尔定律是这样的，有摩尔吸光系数，应该就可以粗略计算啊。
怎么算呢，如果灵敏度不一样，衰减不一样，色谱柱不一样，死体积不一样，这些数据会相差很大的，没法估的，只能你自己跑一针，然后附上所有条件
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有水有渝
xky0230699
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2016/3/28 10:17:09 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没有做过对比，无法直接转换估算。也估算估计得做吸光度与峰面积或峰高的数据模型，需要大数据分析且准确度未知，楼主做这个估算的目的是什么能不能告知一下？
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moshanghuakai
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2016/3/28 11:22:16 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lhy86725(lhy86725) 发表:
怎么算呢，如果灵敏度不一样，衰减不一样，色谱柱不一样，死体积不一样，这些数据会相差很大的，没法估的，只能你自己跑一针，然后附上所有条件
可以不接色谱柱来估算。估算方法一定是有的，只是我们还不知道，否则朗博比尔定律那不是废了吗？你说的这些肯定是有影响，但不是说不能估算，或者你认为我没必要估算。
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moshanghuakai
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2016/3/28 11:28:55 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
没有做过对比，无法直接转换估算。也估算估计得做吸光度与峰面积或峰高的数据模型，需要大数据分析且准确度未知，楼主做这个估算的目的是什么能不能告知一下？
我有一个样品，100uM， 进样5ul, 峰高只有20mAU, 但是峰形尖锐对称，出峰时间4s (UPLC). 但是峰高较低，所以导致我的检测限很高。所以我想估算一下。
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夏天的雪
bingwang228
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2016/3/28 11:58:54 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
个人感觉估算的意义不大，影响因素太多，色谱柱规格、流动相都会产生影响
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lhy86725
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2016/3/28 18:37:03 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 moshanghuakai(moshanghuakai) 发表:
可以不接色谱柱来估算。估算方法一定是有的，只是我们还不知道，否则朗博比尔定律那不是废了吗？你说的这些肯定是有影响，但不是说不能估算，或者你认为我没必要估算。
朗伯比尔是成立的，但信号和A是个比例关系，到底怎么个比法，仪器的性能和参数来决定，至于数值需要试验出来的，估算只能算A的理论值
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