主题：【讨论】请教:HPLC可以用氩气脱气吗???

流动相使用前必须进行脱气处理 ,以除去其中溶解的气体(如O2),以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时,因压力降低而产生气泡.气泡会增加基线的噪音,造成灵敏度下降,甚至无法分析.溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化,柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能.若用FLD,可能会造成荧光猝灭.
氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高.
最常用的在线脱气法为鼓泡,即在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中.严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来.

一般说来有机溶剂中的气体易脱除,而水溶液中的气体较顽固.在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法,这种连续脱气法在电化学检测时经常使用.但氦气昂贵,难于普及.

氦气是惰性元素之一。其单质氦气，分子式为 He，是一种稀有气体，无色、无臭、无味。它在水中的溶解度是已知气体中最小的，化学性质十分不活泼，既不能燃烧，也不能助燃。

稀有气体的熔、沸点都很低，氦的沸点是所有单质中最低的。它们的蒸发热和在水中的溶解度都很小，这些性质随着原子序数的增加而逐渐升高。

When Temp. = 20C and 1atm，
氩气在水中的溶解度 ~33 ml/l
氦气在水中的溶解度 ~10 ml/l
氧气在水中的溶解度 ~31ml/l
N2在水中的溶解度  ~154ml/l
CO2在水中的溶解度  ~878ml/l
氦气置换空气有道理:空气(氧气)在水中的溶解度大(因有极性), 但氦气溶解度却少,大量氦气将氧气带走后,残留在水中的氦气也很少(因惰性)。



在流动相配制好后,一定要进行脱气.除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用

HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作.气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度,基线稳定性,甚至使无法检测.(噪声增大,基线不稳,突然跳动).此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品,流动相甚至固定相(如烷基胺)反应.溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差.
溶解氧能与某些溶剂(如甲醇,四氢呋喃)形成有紫外吸收的络合物,此络合物会提高背景吸收(特别是在260nm以下),并导致检测灵敏度的轻微降低,但更重要的是,会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰(假峰).在荧光检测中,溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象,特别是对芳香烃,脂肪醛,酮等.在某些情况下,荧光响应可降低达95%.在电化学检测中(特别是还原电化学法),氧的影响更大.
除去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能,也将改善在一些荧光检测应用中的灵敏度.
常用的脱气方法有:加热煮沸,抽真空,超声,吹氦等.对混合溶剂,若采用抽气或煮沸法,则需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化.超声脱气比较好,10~20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了(一般500ml溶液需超声20~30min方可),此法不影响溶剂组成.超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触,以免玻璃瓶破裂,容器内液面不要高出水面太多.

离线(系统外)脱气法不能维持溶剂的脱气状态,在你停止脱气后,气体立即开始回到溶剂中.在1~4小时内,溶剂又将被环境气体所饱和.
在线(系统内)脱气法无此缺点.
最常用的在线脱气法为鼓泡,即在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中.严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来.

Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术, 在线脱气,智能控制,无需额外操作,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系.

原文由 penn007 发表:
流动相使用前必须进行脱气处理 ,以除去其中溶解的气体(如O2),以防止在洗脱过程中当流动相由色谱柱流至检测器时,因压力降低而产生气泡.气泡会增加基线的噪音,造成灵敏度下降,甚至无法分析.溶解的氧气还会导致样品中某些组份被氧化,柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能.若用FLD,可能会造成荧光猝灭.
氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低,连续吹氦脱气,效果较好,但成本高.
最常用的在线脱气法为鼓泡,即在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中.严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来.

一般说来有机溶剂中的气体易脱除,而水溶液中的气体较顽固.在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法,这种连续脱气法在电化学检测时经常使用.但氦气昂贵,难于普及.

氦气是惰性元素之一。其单质氦气，分子式为 He，是一种稀有气体，无色、无臭、无味。它在水中的溶解度是已知气体中最小的，化学性质十分不活泼，既不能燃烧，也不能助燃。

稀有气体的熔、沸点都很低，氦的沸点是所有单质中最低的。它们的蒸发热和在水中的溶解度都很小，这些性质随着原子序数的增加而逐渐升高。

When Temp. = 20C and 1atm，
氩气在水中的溶解度 ~33 ml/l
氦气在水中的溶解度 ~10 ml/l
氧气在水中的溶解度 ~31ml/l
N2在水中的溶解度  ~154ml/l
CO2在水中的溶解度  ~878ml/l
氦气置换空气有道理:空气(氧气)在水中的溶解度大(因有极性), 但氦气溶解度却少,大量氦气将氧气带走后,残留在水中的氦气也很少(因惰性)。



在流动相配制好后,一定要进行脱气.除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用

HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作.气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度,基线稳定性,甚至使无法检测.(噪声增大,基线不稳,突然跳动).此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品,流动相甚至固定相(如烷基胺)反应.溶解气体还会引起溶剂pH的变化,对分离或分析结果带来误差.
溶解氧能与某些溶剂(如甲醇,四氢呋喃)形成有紫外吸收的络合物,此络合物会提高背景吸收(特别是在260nm以下),并导致检测灵敏度的轻微降低,但更重要的是,会在梯度淋洗时造成基线漂移或形成鬼峰(假峰).在荧光检测中,溶解氧在一定条件下还会引起淬灭现象,特别是对芳香烃,脂肪醛,酮等.在某些情况下,荧光响应可降低达95%.在电化学检测中(特别是还原电化学法),氧的影响更大.
除去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能,也将改善在一些荧光检测应用中的灵敏度.
常用的脱气方法有:加热煮沸,抽真空,超声,吹氦等.对混合溶剂,若采用抽气或煮沸法,则需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化.超声脱气比较好,10~20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了(一般500ml溶液需超声20~30min方可),此法不影响溶剂组成.超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触,以免玻璃瓶破裂,容器内液面不要高出水面太多.

离线(系统外)脱气法不能维持溶剂的脱气状态,在你停止脱气后,气体立即开始回到溶剂中.在1~4小时内,溶剂又将被环境气体所饱和.
在线(系统内)脱气法无此缺点.
最常用的在线脱气法为鼓泡,即在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中.严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来.

Agilent1100LC真空脱机利用膜渗透技术, 在线脱气,智能控制,无需额外操作,成本低,脱气效果明显优于以上几种方法,并适用于多元溶剂体系.

说得好！应该加精！

最后一句不对，氦气脱气效果是最好的。

安捷伦的真空脱气机非常差，我同学单位2台全坏了
修了4万多块

应该是可以的
我们气相有时没氮气了
还用ＨＥ气做载气呢，做样品也是可以的
应急是可以的啊
就是太贵了

原文由 byron1111 发表:
氩气在水中的溶解度  33.6 ml/l

  氦气在水中的溶解度  8.8 ml/l

  氧气在水中的溶解度  31ml/l

 
    似乎氩气不能用来脱气。

不是仅仅稀有，就可以用来脱气。要看溶解度的
byron1111的数据很有说服力。

He是最好的。至于气相，本来用氦气就比氮气好，把氮气换成氦气当然很好。但对于脱气机，氦最好。没听说过用氩气。

不胜感激
这里真的是个学习的好地方,有那么多的良师益友

氩气在水中的溶解度 33.6 ml/l
氦气在水中的溶解度 8.8 ml/l
氧气在水中的溶解度 31ml/l
空气在水中的溶解度 18.7 ml/l
氮气在水中的溶解度 15.5 ml/l
氦气最好,溶解度小,为惰性气体,可以驱除氧气等流动中的溶解气体.氦脱气就是用氦气取代溶液中原先溶解的空气，那么溶解度大的气体不能用来脱气。