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液相色谱（LC）
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主题：【讨论】不同流动相，峰位置会不同么？

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longly
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2006/12/30 22:15:00 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lqqer 发表:
同样的样品，采用不同的流动相，C18的色谱柱相同，样品配制相同，前者使用梯度洗脱，后者不使用梯度洗脱，流动相均为缓冲盐的有机相流动相，反相体系。
这两者如果出峰，色谱峰位置是否会有顺序上的差别呢？主峰和杂质峰是否会颠倒顺序？还是会相同顺序流出呢？谢谢！


你这样说，很难答复你。有些非极性物质对流动相的极性很敏感，只要水相和有机相的比例轻微地变动，出峰时间就会有很大的变化，但有此极性物质对流动相的比例不敏感，无论怎样改变比例，出峰时间都只会改变很少很少。如果你的样品里同时含有这些物质，改变流动相比例，出峰顺序和时间就可能改变。同理，PH和缓冲盐的改变，溶剂的改变都会有这种现象出现，甚至出现更复杂的反应。
所以你不说清楚，没有人能帮到你的！
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深海的海豚
lqqer
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2006/12/30 22:17:00 12楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zhz1285 发表:
个人认为楼主最好把条件说一下,把样品说明下,才有可能讨论,不然没有可靠的数据只是凭猜测!
  我猜测因为流动相的变化,导致溶剂的洗脱能力变化,比如先是有机比例大,那就可能导致样品中一些有机成分大的流出的快些.如果增大无机的比如水, 就可能使样品中亲水基团起作用的物质先流出,总之色谱中的机理很复杂,不是有可能,很肯定有,具体要通过实际操作来证实!
  个人一点小建议:)

样品为头孢类酸性物质，你说得原理倒还是可以理解，但是为什么大家的观点差距却很大呢？如果需要进行某个杂质的定性，如果无法确定它出峰顺序是否和原来一致，就很难判断了，是否必须要做质谱才可以呢？
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aeyyzbb
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2006/12/30 22:25:00 13楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
反相柱子条件下,理论上增加流动相的极性出峰时间会延长,如果在梯度条件下,杂质的极性和主峰的极性相近,会有可能顺序颠倒,但在非梯度条件下,无论如何改变条件,它们的顺序是不会变的,只是分离度会改变.具体还的看实验.
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shgtj
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2006/12/31 9:38:00 14楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 aeyyzbb 发表:
反相柱子条件下,理论上增加流动相的极性出峰时间会延长,如果在梯度条件下,杂质的极性和主峰的极性相近,会有可能顺序颠倒,但在非梯度条件下,无论如何改变条件,它们的顺序是不会变的,只是分离度会改变.具体还的看实验.
非梯度条件下，如果改变流动相也可以改变出峰顺序的。
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