主题:【已应助】水相中添加剂的作用

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Ins_d77c34e9
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我知道水相里面会添加三氟乙酸 三乙胺等添加剂 不过不知道加这类添加剂的目的 比如说添加了三氟乙酸 目的是调节酸性和极性嘛?
最佳答案:dahua1981回复于2021/07/28
三氟乙酸作为离子对试剂,主要起到改善峰形,调节保留时间的作用
三乙胺(二乙胺)主要是作为收尾剂的作用,用于改善峰形拖尾
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dahua1981
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在反相色谱分离多肽和蛋白质的实验中,使用三氟乙酸 (TFA) 作为离子对试剂是常见的手段。流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作用,来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。
三氟乙酸优于其他离子修饰剂的原因是它容易挥发,可以方便地从制备样品中除去。另一方面,三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于 200nm ,对多肽在低波长处的检测干扰很小。
dahua1981
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三氟乙酸作为离子对试剂,主要起到改善峰形,调节保留时间的作用
三乙胺(二乙胺)主要是作为收尾剂的作用,用于改善峰形拖尾
xiaogumd11
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流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相,和残留的极性表面以多种模式相互作用,来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。
JOE HUI
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参考如下:流动相中的三氟乙酸通过与疏水键合相和残留的极性表面以多种模式相互作用,来改善峰形、克服峰展宽和拖尾问题。三氟乙酸与多肽上的正电荷及极性基团相结合以减少极性保留,并把多肽带回到疏水的反相表面。以同样的方式,三氟乙酸屏蔽了固定相上残留的极性表面。三氟乙酸的行为可以理解为它滞留在反相固定相的表面,同时与多肽及柱床作用。
三氟乙酸优于其他离子修饰剂的原因是它容易挥发,可以方便地从制备样品中除去。另一方面,三氟乙酸的紫外最大吸收峰低于200nm ,对多肽在低波长处的检测干扰很小。
改变三氟乙酸的浓度,可以细微地调整多肽在反相色谱上的选择性。这一影响对于优化分离条件、增大复杂色谱分析(如多肽的指纹图谱)的信息量是非常有益的。[2]
三氟乙酸添加在流动相中的浓度一般为 0.1% ,在这个浓度下,大部分的反相色谱柱都可以产生良好的峰形,当三氟乙酸浓度大大低于这个水平时,峰的展宽和拖尾就变得十分明显.
安平
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      流动相中是否需要添加酸、盐类,与待测物质本身性质有关系。

      如果目标物质呈弱酸性或者容易在中性或者碱性水溶液中解离,那么容易产生拖尾和保留较弱的问题。

      一般需要在流动相中添加酸,抑制物质的解离,掩蔽色谱柱固定相表面的活性点,增强目标物质的保留和减弱拖尾问题。


     
Ins_d77c34e9
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原文由 安平(byron1111) 发表:            流动相中是否需要添加酸、盐类,与待测物质本身性质有关系。            如果目标物质呈弱酸性或者容易在中性或者碱性水溶液中解离,那么容易产生拖尾和保留较弱的问题。            一般需要在流动相中添加酸,抑制物质的解离,掩蔽色谱柱固定相表面的活性点,增强目标物质的保留和减弱拖尾问题。           
强酸性呢?是不是也添加酸添加剂??
dadgoh
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另外,这些添加剂有时还有减小一些色谱柱的柱压。
nemo001
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安平
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原文由 Ins_d77c34e9(Ins_d77c34e9) 发表:
强酸性呢?是不是也添加酸添加剂??


具体是哪种强酸呢?详细说说具体情况为好。

分析强酸,一般不推荐用反相色谱。
m3005249
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