维权声明:本文为Insp_8cbe6c2c原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
鱼腥草注射液中增溶剂吐温80的限量测定
1 溶液的制备对照品溶液的制备取吐温80
对照品适量至100mL
量瓶中,精密称定,加重蒸水制成9.83 mg·mL
-1的溶液。供试品溶液的制备精密移取鱼腥草注射液1mL
置100 mL
离心管中,加铵钴硫氰酸盐溶液15 mL
(取硝酸钴6g
,硫氰酸铵40 g
,加水溶解并稀释至200 mL
,摇匀,即得),精密加入二氯甲烷10mL
,称定重量,置调速多用振荡器振荡30 min
,取出,用二氯甲烷补足减失的重量,移至分液漏斗中,静置30 min
,分取二氯甲烷层溶液,作为供试品溶液。2测定波长的选择 对照品溶液与供试品溶液经显色反应后,在400~ 700 nm
波长范围内分别进行扫描,结果发现吐温80
对照品溶液与鱼腥草注射液供试品溶液峰形一致,最大吸收波长一致,均为623 nm
。3方法学考察 专属性试验取空白溶液(水)、鱼腥草重蒸馏液(未加吐温80
,作阴性对照)、对照品吐温80
、鱼腥草注射液照,按“供试品溶液的制备”项下方法显色后比较吸光度,结果在623 nm
波长处,空白溶液的吸光度为0.002
,阴性对照溶液的吸光度为0.001
,鱼腥草注射液和对照品均有较好吸收,表明鱼腥草注射液中其它组分对本试验测定结果无干扰,阴性对照溶液与空白溶液在623nm
波长处无吸收。见Fig.1
。(A)
(B) (C)
(D)
Fig.1 The ultraviolet spectra of the blank solution (A)、negative control sample (B)、tween80 control sample (C) and real sample (D)
线性和范围精密量取吐温80
对照品溶液0.5
,1.0
,2.0
,4.0
,8.0
,10mL,
置100 mL
离心管中,分别加入硫氰钴铵溶液15mL
,精密加入二氯甲烷 10 mL
,称定重量,置调速多用振荡器上振荡(室温,88rpm
)30 min
,取出,用二氯甲烷补足减失的重量,移至分液漏斗中,静置30min
,分取下层溶液,在 623 nm
波长处测定吸光度,以二氯甲烷为空白对照,以吸光度(A)对吐温80
对照品浓度(C)进行线性回归,绘制标准曲线,回归方程为:
A = 1.57×10
-1C+ 2.5×10
-3,r= 0.9999
。结果表明,吐温80
在0.49 ~ 9.83 mg·mL
- 1范围内与吸光度呈良好的线性关系。 精密度试验取同一“供试品溶液的制备”项下的鱼腥草注射液供试品溶液,在623nm
波长下进行测定6
次,测定结果RSD
为0.4%
,表明仪器精密度良好。重复性试验取同一批鱼腥草注射液6
份,按“供试品溶液的制备”项下制备供试品溶液,在623 nm
波长处测定,所测吐温80
含量的RSD
为0.5%
,表明该方法重复性良好。稳定性试验取“供试品溶液的制备”项下的鱼腥草注射液供试品溶液,在623nm
波长下分别于0
、1
、2
、4
、8
、12h
测定吸光度,测定结果RSD
为0.5%
,表明供试品溶液在显色后12 h
内稳定。回收率试验精密量取已知含量的鱼腥草注射液0.5mL
置100 mL
离心管中,共9
份,每3
份1
组,分别精密加入吐温80
对照品sd
2溶液1.1
,1.3
,1.6mL
,按“供试品溶液的制备”项下的方法制备供试品溶液,在623 nm
波长下测定,测定吐温80
的平均回收率为99.2%
,RSD
为0.4%
(n=9
)。4.样品测定精密移取各批鱼腥草注射液1 mL
,置100mL
离心管中,按“供试品溶液的制备”项下进行显色反应,在623 nm
波长下测定吸光度。对鱼腥草注射液(10
批)中的吐温80
含量进行了测定,其含量在1.44~ 2.50 mg·mL
-1。