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主题：【分享】【“仪”起享奥运】直接法检测牛奶中β-内酰胺酶

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发表于：2024/08/09 12:20:13 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
方法原理：牛乳中的青霉素钾在β-内酰胺酶的作用下，主要生成青霉噻唑酸钾，并伴随生成少量的青霉胺、青霉醛等物质。经去脂肪、蛋白等前处理后，可以将青霉噻唑酸钾提取出来，经高效液相色谱仪检测确认其是否存在，从而判定该牛乳是否为人造“无抗奶”。

实验步骤：称取20 g试样，在4 ℃、16000 rpm条件下离心10 min。取下层清液10 g于50 mL塑料离心管，加入无水乙醇15 mL，振荡提取30 min后离心，取清液经0.45 μm的滤膜过滤，用高效液相色谱仪检测。

标准溶液配制：称取0.01 g（精确至0.001 g）青霉素钾于100 ml容量瓶中，加入1ml市售抗生素分解剂，室温放置2h使青霉素钾酶解完全后用去离子水定容，得到青霉噻唑酸钾标准溶液，浓度100 μg/mL。根据实际情况稀释后使用。

色谱条件：LabAlliance PC-2000高效液相色谱配2000型紫外检测器；

lanbo色谱柱 :C18(4.6mm×150mm×5μm)；

          流动相: 甲醇/0.004 M磷酸二氢钾（pH=4.5）＝40/60；

          检测波长: 230 nm
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