主题：【第十七届原创】色谱异常鬼峰的罪魁祸首，居然是它

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菜鸟分析队发表于：2024/08/16 11:06:14 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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色谱异常鬼峰的罪魁祸首，居然是它

每次长假过后，都是仪器故障及各种问题高发期。单位有一台安捷伦1260液相色谱，使用的流动相为甲醇/乙腈/水，过节前使用时都是好好的，正常分析样品，不管是出峰还是基线都是正常的，放假关机前也特意将各个通道冲洗并用有机相进行置换。自认为已经做足了维护保养工作，结果过完节来分析样品还是出现了问题。

我们可以从上面两张图看出，图2 是正常基线，基线后端比较平整，且后端因流动相梯度变化仅有基线上升趋势，并无异常出峰。而从图1可以看到，基线从13.5min开始就出现了异常波动，有一个凸起，然后到了17min往后就有一个大的出峰。这种情况在做产品纯度分析的时候，会给正常测试带来较大干扰，会使得后端杂质出峰不准确。

接下去便开始了问题排查工作，光通过上述情况，我先下了一个初步结论，那就是仪器污染残留造成的异常出峰。因为仪器不止我一个人使用，因而在排查之前我先找上一个使用者了解情况，了解之前运行情况是否异常，还有都分析了什么样品，评估一下是否是之前使用者走了脏样造成这种情况。最终了解下来前面一个使用者并未运行脏样，只是普通正常测试，而且因为和我运行的流动相梯度不一样，因此从图谱上并未看出有明显异常，故而将样品污染这种可能性排除了。

接下去怀疑是仪器压力波动，但是调阅整个序列的压力曲线和每一针的基线情况发现，正常基线时的压力波动和异常基线时的压力波动是完全重合的，而且也不是偶然性的情况，基线异常每一针都能重现。然后继续排查色谱柱的问题，找到相同型号的两根色谱柱，将另外一根好的柱子换上，将换下的柱子装在另外一台仪器上，使用相同的流动相和运行程序进行运行。结果显示，即使将色谱柱换成新的，也依旧出峰异常，旧的柱子放在另外一台液相上分析，走出的基线是好的。由此证明，问题来源不是色谱柱，而是仪器方面，剩下的能够排查的也就只有流动相了，我检查发现仪器上甲醇是新换的，还有满满一整瓶，而乙腈和水都不多了，我便将乙腈和水都换了，继续运行走样程序，发现基线异常依旧，此时我还怀疑是水的问题，便使用不同来源的水进行尝试，结果并无变化。

那么问题到底出在哪里？流动相就甲醇没有换，难道是甲醇问题？关键甲醇是一瓶新换上的，难不成被污染了？抱着将信将疑的心态便又从试剂库里面拿来一瓶未开封的4L甲醇，换上后运行方法，结果依然如此，这时让人有点摸不着头脑了。于是又从其它仪器上拿来一瓶用过的流动相甲醇换上尝试，结果出乎意料，居然没问题了，一开始还不信，连续进样多次，证明确实恢复正常了。那么问题就显而易见了，仔细对比发现，原先装在仪器上几乎满瓶的甲醇与我后来新开的甲醇是同一个批次，而另外一台仪器上的甲醇与我从其它仪器上拆来的甲醇均为以前的批次。

搞了半天原来罪魁祸首是它，事后跟同事交流发现，过完节后因为原来那瓶甲醇流动相太少了，同事就帮它换成了新的，也就是出问题的批次，这就解释的通为什么节前分析还正常的，节后分析就不正常了。虽然造成液相出峰异常的原因有很多，但还是第一次遇到4L满瓶甲醇有问题的，看来即使是进口试剂，也不能百分百保证质量稳定啊！