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主题：【分享】【金秋计划】尿毒康合剂通过提高肠外泌体中MiR-146a水平抑制CKD大鼠微炎症

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发表于：2024/09/03 18:00:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
尿毒康合剂(NDK)是一种以其降低慢性肾病(CKD)患者血清肌酸水平的能力而闻名的制剂，为广东省中山市中医院院内制剂。NDK由黄芪、茯苓、白术、大黄、川芎、红花、丹参、地榆组成。用于治疗CKD湿浊内留、气虚血瘀的本虚标实之证，具有祛湿浊、通肾络、益气健脾功效。临床研究表明，该方具有增强肾功能、降低血肌酐、延缓ESRD发病的作用。然而，NDK在慢性肾脏疾病中的作用和过程尚不清楚。

确定microRNA-146a (miR-146a)是否与CKD微炎症相关，以及NDK是否通过调节miR-146a/核因子κ b (NF-κB)信号通路来保护CKD微炎症。


(1)建立腺嘌呤诱导的大鼠慢性肾脏疾病模型。通过RT-PCR检测血浆和回肠外泌体中miR-146a的水平。(2)用脂多糖(LPS)刺激克隆的人结肠腺癌(Caco-2)细胞，并用miR-146a模拟物和抑制剂转染。随后，采用western blot和RT-PCR技术检测toll样受体4 (TLR4)、NF-κB和TNF受体相关因子6 (TRAF6)蛋白和mRNA的表达量。(3)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)的水平。(4)提取血浆外泌体，超高速离心提取肠组织外泌体。阴性染色电镜观察外泌体的形态及肠组织和外泌体的超微结构。使用纳米颗粒跟踪分析测量外泌体的粒径。


CKD大鼠的病理特征包括全身性微炎症，这可能与肠组织外泌体的释放有关。NDK抑制CKD大鼠Caco-2细胞的炎症反应，降低IL-1β、IL-6和TNF-α水平。调节炎症的miR-146a的表达在CKD大鼠血浆源性外泌体和肠源性外泌体之间存在差异，这可能是由于刺激回肠外泌体释放到血液中。NDK能有效降低CKD大鼠回肠组织中TRAF6、NF-κB和TLR4的水平。

NDK可以通过促进肠外泌体的释放，从而促进外泌体相关miR-146a的释放，抑制微炎症，从而有效改善CKD大鼠的微炎症。
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