主题:【分享】荧光分光光度法总结

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荧光概念
受光激发发射长波光,光停发光消,称荧光,源于共轭双键体系分子。
荧光分光光度法《
中国药典》:灵敏、选择性强、样量少、简便。
荧光光谱:包括激发光谱和发射光谱,用于定性分析。荧光强度与浓度在一定范围内成正比(F=Kc),高浓度时自熄灭。
仪器与用具:荧光分光光度计:光源(高压汞蒸气灯/氙弧灯)、激发/发射单色器、样品室、检测器、数据处理系统。
性能检测:检出极限、荧光光谱峰值强度重复性。
玻璃仪器需高度洁净。
试药与试剂:使用双重蒸馏水、高纯度试剂,必要时预处理。
操作方法:选定激发/发射波长,配制溶液,按仪器操作。对照品比较法/标准曲线法测定含量。
记录与计算:使用公式计算供试品浓度,控制线性范围(0.5~2)。
结果与判定:用于含量、溶出度、含量均匀度测定,相对平均偏差±2.0%以内。
注意事项:仪器放置平稳,避免干扰。溶剂、玻璃仪器、石英比色皿需纯净。控制温度、除去溶解氧。注意溶液pH值和试剂纯度。调整供试品溶液浓度和仪器测量条件。避免激发光过度照射,使用基准溶液校正。确定合适的激发/发射波长。
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