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主题：【资料】SCX小柱使用方法，如活化，淋洗，洗脱等条件，急

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huazhong98

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发表于：2007/07/25 09:32:00 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

选用的阳离子SCX固相萃取小柱，测肌肉中的卡巴多，和喹乙醇很像，是一种促生长剂，可使用柱子的时候，回收率很低，请问哪位大侠用过这种柱子啊，我查了资料，使用5ML甲醇，5ML水，5ML稀盐酸活化，可样品液过柱损失不小啊，影响回收率，请问前对样品液的PH值要求高吗，还有淋洗和洗脱选用什么比较合适啊，我试了用水和甲醇淋洗，都有损失，郁闷啊

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2007/7/25 11:55:00 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

SCX是强阳离子交换柱，一般用于除掉样品中的强阴离子，比如无机离子。
不是太清楚你做的卡巴多的具体性质，是要把它和什么分离开来呢？你想要的柱保留是目标物还是杂质？
曾看过一篇东西，估计会对你有帮助。HPLC分离喹乙醇、卡巴多及其代谢物，流动相用的是：甲醇、水和乙酸钠缓冲液(pH 4.6)。供参考
http://www.instrument.com.cn/journal/magazine/passage_11839.htm

--锐锋科技，祝您一臂之力

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Last edit by tome-zhao

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2007/8/23 13:40:00 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基质和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离或者富集目标化合物的目的。固相萃取实际上采用的是液相色谱的分离原理,分离模式主要包括反相、正相、离子交换和吸附。固相萃取所用的吸附剂与液相色谱常用的固定相相同,只是在填料的形状和粒径上有所区别。一般来讲,固相萃取填料的粒
径分布较液相色谱柱中的要宽,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。
固相萃取小柱的吸附剂通常装填于聚丙烯柱筒底部,并由上下两层聚丙烯或聚四氟乙烯筛板固定;也有96 孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小规格、吸附剂的种类及装量都配有多种选择。
固相萃取小柱使用的基本步骤包括以下5 步
111 　预洗
预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。
112 　活化
首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。
113 　上样
选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。
114 　冲洗
用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。
115 　淋洗
用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。

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