主题:高效液相梯度洗脱应如何做?请各位高手帮忙(急!!!)

浏览0 回复5 电梯直达
lin21zj
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我以前没有做过梯度洗脱的实验,现在我接了一个新实验是这样的流动相C为0.1%TFA,B为0.1%TFA乙腈水(80:20)
梯度是这样的:(流速为0.75ml/min)
time(min)      B%      C%
0              0.0      100.0
30.0            15.0    85.0
75.0            35.0    65.0
115.0          85.0    15.0
120.0          100.0    0.0
125.0          0        100.0
145.0          0        100.0
在梯度洗脱之前用什么来平衡柱子(C8),时间从125.0-145.0)这一段时间是不是在冲洗柱子?数据的采集应该是哪一段时间?一般做完实验后用哪一个流动相来冲洗柱子?请大家帮帮忙!谢谢了!
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zfr
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不知道你用的是哪家的HPLC ?
平衡柱子一般是用你的梯度程序的第一行,也就是 Initial 行,一般最后程序的一行与第一行相同,也就是在做完样品之后,在进下一针之前以初始状态再重新平衡系统
数据采集在系统平衡好,也就是基线走平之后开始
冲柱子所用的流动相要根据你所用的柱子和你的实验条件来决定
shgtj
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梯度洗脱之前用什么来平衡柱子(C8),时间从125.0-145.0)这一段时间是不是在冲洗柱子?数据的采集应该是哪一段时间?一般做完实验后用哪一个流动相来冲洗柱子?
洗脱之前用C125~145应该是洗柱子数据采集应该从0~145做完试验应该用C冲洗平衡柱子,没有试验了用甲醇冲洗。
free_siemens
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lin21zj
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无为
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