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主题：【讨论】有没有用液相做氨基酸分析的？

浏览0 回复50 电梯直达
glory143
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发表于：2008/04/10 08:50:09 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
悬赏金额：80积分 状态： 已解决
为什么测得的氨基酸总和一直偏高呢？
用柱前衍生化，测定16种氨基酸，氨基酸总和总比粗蛋白高，如果是样品前处理的问题，那问题应该是出在哪里呢？？酸水解时间的影响？目前是水解22小时，上机的样品瓶是用浓硝酸泡过，重复使用的，瓶盖隔垫也是重复使用的？这些会不会存在污染？
氨基酸总和比粗蛋白高的意思是这样的，打个比方说鱼粉中粗蛋白含量是60%，而氨基酸总和却达到70%，粗蛋白与氨基酸总和的比例关系是比较固定的，除了玉米蛋白粉等少数原料以外，基本是不会出现氨基酸总和高于粗蛋白含量的.
目前做了标样浓度梯度（100、150、200、250pmol/ul）和样品浓度稀释（2倍、4倍稀释）实验,结果显示标样的线性关系很好，上机样品液稀释后结果低于未稀释的，但是氨基酸总和高于粗蛋白含量的问题仍然存在？基本确定是样品前处理的问题，但是问题出在哪里呢？
我用的标样的溶剂是0.1M盐酸，而上机样品液溶剂是水，这个影响很大吗？？如果样品上机液溶剂改用盐酸或者流动相，哪个更好一点？

感谢大家提出的意见和建议

问题已经解决了，再次谢谢大家的意见
推荐答案：jxlinsz回复于2008/04/15
我认为还是水解底物出问题.前不久我做复合氨基酸中的氨基酸态氮的时也发生类似的问题.用水做稀释时,结果不正常,且比产品标示值大2-3倍.后改用黄酒做稀释,结果才正常.
补充答案：

我的8090回复于2008/04/16


我们做的一样，建议你用内标法处理看
用什么做内标物呢？
我们做是a-氨基丁酸，也可用其他样品里面没含有的

changesight回复于2008/04/10

可能是你衍生出了问题吧,是不是标准品反应不完全啊?俺以前也做过,都是偏低,还没听说过偏高呢.

雪妖回复于2008/04/11


对，我建不了群，谁建？

活到九十 学到一百回复于2008/04/14

楼主的标样有没有问题啊？是不是标样浓度偏低？

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2008/4/10 9:01:34 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
呵呵,没做过,但是现在在找关于这方面的资料,你可不可以那你的分析条件发给我一下,我的邮箱是czj_1027@163.com谢谢你了,现在都不怎么好找资料了.
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活到九十 学到一百
wangboxzzjs
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2008/4/10 9:50:20 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
问题能不能再讲的详细一些？你怎么知道是偏高的？
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glory143
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2008/4/10 10:07:30 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
每次都做粗蛋白的，而不管什么原料样品，氨基酸总和都比粗蛋白含量还要高很多
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ysh_feng
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2008/4/10 10:59:57 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很少有人做,不过每个省的CDC肯定做,因为食品就是它们检测的
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shanyu
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2008/4/10 16:03:26 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
RE:【讨论】有没有用液相做氨基酸分析的？好像需要什么东西吧？
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changesight
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2008/4/10 16:25:16 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是你衍生出了问题吧,是不是标准品反应不完全啊?俺以前也做过,都是偏低,还没听说过偏高呢.
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changesight
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2008/4/10 16:29:34 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可能是你衍生出了问题吧,是不是标准品反应不完全啊?俺以前也做过,都是偏低,还没听说过偏高呢.
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glory143
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2008/4/10 16:56:09 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么标准品会反应不完全呢？我的标准品浓度是250pmol/ul，是不是浓度有些高了？？
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yhsun
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2008/4/10 18:48:49 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
氨基酸和粗蛋白是两个概念. 不要混淆.
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pchduan
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2008/4/10 23:16:13 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我一直用液相分析氨基酸，结果都挺理想的，有机会可以交流一下啊
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