【求助】液相色谱检测茶多酚分离效果不好

dickwang2008

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2009/3/4 13:43:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wanyanfei22 发表:
液相色谱检测茶多酚分离效果不好

楼主想要大家帮你分析问题所在,请把你的色谱条件说明.

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wanyanfei22

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2009/3/4 13:53:36 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

情况是这样的，我们用的是戴安的液相，样品分离的不大好，两个峰分不开。听说用导津的C18能分开，我们现在用的是国产柱子。流动相我暂时还不知道，有没有好点的方法可以让峰分的好一点

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dickwang2008

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2009/3/4 14:10:33 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wanyanfei22 发表:
情况是这样的，我们用的是戴安的液相，样品分离的不大好，两个峰分不开。听说用导津的C18能分开，我们现在用的是国产柱子。流动相我暂时还不知道，有没有好点的方法可以让峰分的好一点

关于峰的分离，一是调节流动相系统，二是更换合适的色谱柱，其中后者更为关键。

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czx3000

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2009/3/4 14:22:39 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

分离效果不好，是峰形重叠，还是没有很好的分离度。分离效果主要在于色谱柱的选择，既然C18能分开，我想色谱柱不会差的很远，调一下流动相试一试，流速放慢，不行走个梯度试一试，或者改变流动相，改变PH,升高温度试一试，不能太高最高50度。

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老多_小多

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2009/3/4 14:47:42 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

茶多酚是一类物质，如果标准没问题，样品分不开的话就说明不适合用HPLC 测定

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wanyanfei22

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2009/3/4 15:49:21 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢，还要问一下升高温度能分离度能增加吗？实验用的是30度，我就不明白怎么导津的能分的很好，国产的却不行，同样是C18的柱子

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tomdreams

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2009/3/4 16:07:27 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wanyanfei22 发表:
谢谢，还要问一下升高温度能分离度能增加吗？实验用的是30度，我就不明白怎么导津的能分的很好，国产的却不行，同样是C18的柱子

同样的C18，可能封尾技术不同，硅球不同，表面的C覆盖率不同等等，就会造成色谱柱的性能差异很大。

茶多酚是极性很大的物质，可以适当加一些离子对试剂、增加水相比例、减小pH值、略加三乙胺，或许用国产的也能够分离。

柱温30度应该是没有问题的，升高柱温不利于保留，一般来说分离效果会变得更差。

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yiren555

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2009/3/4 18:02:42 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

茶多酚的检测方法国家标准都出了~可以参考下，效果还不错。ELITE的柱子分离效果还行的。

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〓猪哥哥〓

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2009/3/5 19:44:13 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以加入些乙酸或磷酸来改善分离效果。

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wanyanfei22

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2009/3/12 11:48:05 11楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

谢谢，问题解决了

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