中药生物活性测定指导原则起草说明
一、生物活性测定指定原则起草的背景情况
1.1 生物检定和生物检定在药品质量控制中的运用生物检定是利用生物体包括整体动物、离体组织、器官、细胞和微生物等评估
药物生物活性的一种方法。它以
药物的药理作用未基础,以生物统计为工具,运用特定的实验设计,在一定条件下比较供试品和相当的
标准品或对照品所产生的特定反应,通过等反应剂量间比例的运算,从而测得供试品的效价或毒性。
药物质量控制的根本目的是控制
药物的生物活性,保证临床用药的安全性和有效性。对单一而结构稳定的分子,如果标准物质也是纯度很高、与测定目标分子结构一致的
药物制剂,任何试验系统的测定结果都是一致的,包括生物反应的试验系统和物理化学测定,当然应采用精度和经济性最好物理化学测定方法,可以用mg、g等绝对或相对重量表示其量值。对组分的分子结构是未知的或是多组分的不均一的混合体的
药物,就不能用mg、g等绝对或相对重量表示其量值;或者是其重量等量值不能与其临床效应相关的
药物,如不同构型不同活性的激素、酶等
药物,只能从其药理作用中选择一种能代表临床疗效或毒性反应的指标,根据生物检定的方法建立能控制其质量的检定方法。因此,可以认为生物检定是一种测量的工具,尽管相对来说不如重量测定那样精确。
目前,针对药效成分不明确、药效成分太多或制剂中非药效杂质多的
药物制剂,如各种激素、疫苗、免疫血清及毒素、人免疫球蛋白及凝血因子、细胞因子、抗生素、洋地黄制剂等,各国药典都规定了相应的生物检定方法来控制质量。
广义的生物检定,包括使用活生命体的生物检定,和不使用活生命体的受体检定、免疫检定等。受体检定和免疫检定的犯法操作简便、费用低、精度高,但其反应值不完全代表整体动物的生物反应。从试验方法来看,分为体内、体外试验。体内试验的受试对象一般是整体动物,这时的反应代表了药品对整个动物或整个在位组织的反应。体外试验的受试对象一般指细胞、酶、受体等,体外试验仅表达了与受体结合的能力,不完全表达其生物反应。
由于生物检定的前提或方法特点,包括目标物的结构成分不确定,或反应值不完全代表整体动物的生物反应,所以生物检定的结果存在一定的不确定性。生物检定的有效测量是建立在若干假设基础上的:
假设1:标准物质与被测样品是同质的,至少应认为被测样品是标准物质稀释或浓缩的倍数。
假设2:规定的生物试验方法中的生物效应指标,是测量相当于标准物质中的目标物或相似物。
假设3:标准物质与供试品所用的剂量符合实验设计的要求。
因此,生物检定是一种复杂的测量形式,它所采用的标准物质、方法系统、单位含义和试验设计,都需要建立在一定的前提和假设的基础之上,需要借助生物统计的工具及概率的解释,需要随着科学技术的发展而不断完善。生物检定虽复杂而不够精确,但因为其反应生物效应的特点,仍然在药品、生物制品的质量控制中发挥着不可替代的作用,尽管在建立生物检定方法后我们会千方百计找出更适合的方法来取而代之。
1.2、中药进行生物活性测定的意义和可行性1.2.1 中药质量控制尴尬现状体现出生物活性测定的重要性
目前,化学成份的定性、定量测定是现行中药质量控制的常用方法。这种方法,通常针对已知的1~2种指标成分或活性成分,进行定性鉴别和定量测定,众所周知,仅是单味中药所含的化学成分超出百种之多,而一个由4~5味中药组成的复方所含化学成分更是成倍增长,现有的研究越来越多地证实,中药发挥疗效的物质基础常常是多种成分组合产生,因此通过检验l~2个成分控制质量有着非常大的局限,而且常常不能与其生物效应形成关联
[1]。甚至造成了一种化合物在许多不同类别的药品标准中使用,例如,槲皮素的含量测定,在现有不用用途中药制剂中出现的频率之高,成为了中药质量控制尴尬现状的一个典型例证。
这个尴尬现状造成了现在中药质量控制存在很大的局限性。首先,含量测定的指标成分不一定是该药品的有限成分或主要有效成分,即使是主要成分其低微的含量限度与临床有效剂量间也缺乏相关性,因此测定指标成分不能代表控制了
药物的生物活性。其次,低含量的成分测定,造成了上市前药品和上市后药品,甚至不同基源的药品,甚至生产工艺的微小改变,甚至来源生产一致的不同批药品,尽管都符合现在低含量成分测定的质量标准,但是其活性成分却存在很大变数,临床效应没有重现性。这样的问题长久了,引来的是病人和医生对
药物有效性的担心,反过来是对中医药的一种伤害。第三,某些不法分子,在伪劣药品中加入指标成分,可以达到以次充好、以假乱真,欺骗了医生和患者,欺骗了质量检验机构,严重影响临床的用药安全有效。
这些现状反映了在中药的质量控制中,单纯依赖化学成分测定方法,难以达到有效控制制剂疗效的目的,中药注射剂也不例外。
中药注射剂改变了中药传统的给药方式,有着快速、高效的特点。但在目前国家批准的109个品种中,其中大部分为上世纪七八十年代研制的品种,有效成分含量不明确(只有下限),未知的非定量成分的比例相当高
【2】。2006年6月国家药监局在全国范围内停止鱼腥草注射液等7个注射剂后,引发了对中药注射剂的安全性和质量标准的关注热潮。近年来发展的中药指纹图谱技术,虽能较好地反映中药多组分现状,可以检测几十种成分,但也并不能直接与临床效应相关。但是仍然无法与疗效建立直接的联系
【2】。作为直接进入血液循环的药品,质量标准必须应充分地说明制剂应有的生物效应,并尽可能设定安全控制指标。2005年版中国药典明确提出,中药制剂质量标准应以准确检测
药物有效成分为目标,建立有效的方法测定中药中的物质群。现在,中药注射剂在临床中运用的最大阻碍来自对其安全性和有效性的担心和不信任,有文献显示对10个城市37家医院66位医生进行调查,近六成医生认为中药注射剂比抗菌
药物更不安全,近七成医生认为清热解毒类注射剂疗效不如抗生素。
因此,中药生物活性测定是作为直接体现生物效应的方法,能够较好体现出中药临床运用的安全性和有效性,在中药质量标准中设定相应的项目已经刻不容缓。