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主题：【求助】关于测细胞中硒含量的预处理

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发表于：2017/11/04 17:16:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
    实验室要测细胞内硒含量，老板的要求是预处理之后拿到公司测，但是实验室的人之前都没有做过，文献上也没有查阅到关于细胞的做法，想咨询一下大家。
    我们的打算是，培养基里面加硒，然后培养细胞2d，拿出来超声破碎，一个样品加上液体大概有2mL左右，再加硝酸和高氯酸混合酸消化，先过夜，再煮，冷却之后再加HCl。
    萌新的问题是
    1.硝酸和高氯酸的混合酸比例是多少？查的资料是4:1，但是我怕细胞的不一样；
    2.混合酸过夜之后再煮，煮到什么程度呢？查的资料说是剩2mL；
    3.混合酸加的体积是多少呢？资料有说10mL，顺便加了玻璃珠；也有说先加10mL，煮期间不时继续加，煮20min。我不知道改=该采用哪种办法；
    4.煮的时候需要注意什么呢？通风，需要暗室吗？
以上，目前想到的就是这么几个问题，恳请大家施以援手啊，拜谢！
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huangza
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2017/11/7 8:27:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先细胞的我们也没有做过
我们做的是粮食中的硒，混合酸一般用10:1，湿法消解，加入的量是5mL，视样品而定，期间有可能还要补加混合酸
加热的时候肯定是要放在通风橱内的，有有毒气体
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李三疯
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2017/12/26 10:56:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
前处理都是为了无机化，按食品中硒来检测应该没问题吧，GB5009.93
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手机版： 关于测细胞中硒含量的预处理
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