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食品中真菌毒素的测定方法小结
真菌霉素是指真菌在生长繁殖过程中产生的次生有毒代谢产物,食用了含有真菌霉素的食物会导致中毒。食用油中的真菌霉素主要来源于油料作物生长过程中感染病原真菌,还有就是油脂在加工、储存、运输过程中感染真菌霉素。食用油中常见的真菌霉素为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、呕吐毒素以及玉米赤霉烯酮等。
常见的检测方法包括薄层色谱法、
液相色谱法、
液相色谱-质谱联用法、酶联免疫法等。
液相色谱法灵敏度较高、检测限低,是目前国内测定真菌毒素使用最多的方法。
基于HPLC的方法大多采用免疫亲和柱的前处理方法,检测成本较高。也有采用SPE的预处理方法,重现性不高。
瓶颈和方向目前国际、国内的主流趋势是多毒素同时测定的技术,采用的设备为HP
LC-MS/MS,GB5009.22-2016 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定(第一法 同位素稀释
液相色谱-串联质谱法),GB5009.96-2016 食品中赭曲霉毒素A的测定(第三法 免疫亲和层析净化
液相色谱-串联质谱法),GB 5009.111-2016 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定(第一法 同位素稀释
液相德普-串联质谱法),GB 5009.209-2016 食品中玉米赤霉烯酮的测定(第三法
液相色谱-质谱法),但是需要使用碳同位素内标,价格比较昂贵(Sigma 25mg/L, 1mL约1.2万人民币)。开发此种方法前期的投入比较大,但可以节约时间,预处理的时间至少可以节约50%,减少前处理过程中昂贵的免疫亲和柱的使用。
建立多毒素同时测定的方法(LC-MS/MS)。同时扩展检测项目(包含T-2, HT-2, Citrinin, Fumonisin, Ergot alkaloids 、sterigmatocystin、beauvericin、AOH、AME和TeA、enniatins等),另外增加Citrinin, Ergot alkaloids 、sterigmatocystin、beauvericin、AOH、AME和TeA、enniatins主要存在谷物及谷物制品中毒素的检测能力,降低毒素潜在的致畸、致癌风险。
毒素中快检技术的应用
国内市场真菌毒素快检产品主要是基于抗原、抗体(不排除使用受体和配体)特异性反应的免疫快检产品。主要包括胶体金检测卡、酶联免疫检测试剂盒和时间分辨荧光免疫检测卡等,相关的快检仪器设备有酶标仪、胶体金读卡仪和时间分辨荧光检测仪荧光共振能量仪、噬菌体PCR仪、新型电化学传感器等。此外,还包括一些前处理方法和设备,如净化柱、在线免疫亲和柱等。