【求助】中药丸剂提取物对内标测定有抑制作用?中药浓度越高,外加的内标的峰面积却越低?
我把研究的中药丸剂粉末用甲醇超声,离心,取上清,浓度分别为0.4mg/ml,0.2mg/ml,0.1mg/ml;然后取1ul该提取液加入49ul水(相当于我正式实验的一个酶反应体系,所以现在先用水代替一下),再加入200ul含有内标氯雷他定10ng/ml的多潘立酮,离心进
液质。结果发现峰面积从14000,上升到了17000。我后来又换用了氯雷他定作为内标,后来两个内标一起用。怕有残留,所以我从低浓度组做到高浓度组,从高浓度组做到低浓度组都试过,最后的结果都是中药浓度越高,内标峰面积越小。也稍微尝试了将中药浓度稍微下调几倍,仍然是这种结果,但是可能变化趋势会小一点。难道我只能这样,不断减小中药浓度来使得内标稳定吗?可是等我正式实验的时候,中药的浓度太低,对我的正式实验的酶反应体系可能无法发挥效果?求助大家,实验室没有人遇到过这种问题,中药浓度越高,内标峰面积越小。