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液相色谱（LC）
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主题：求助核苷酸检测

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Ins_97e6e388
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发表于：2022/05/19 18:49:56 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位老师好，液相检测核苷酸，新换的柱子，第一针峰型还行，第二针就开始飘了，流动相配制有什么注意事项吗，求帮忙
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2022/5/20 15:30:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以参考一下GB 5413.40-2016标准，不同色谱柱适用的流动相不同。
曾经用过Acclaim 120 C18的25cm液相柱做过核苷酸。
流动相是96%的0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液（pH 4.04）+4%甲醇等度10分钟，1mL/min，柱温是35℃，跑出还算可以的峰形；
核苷酸工作溶液不稳定，需要从储备液开始现配现用，储备液到工作溶液的溶剂都是纯水；
0.01mol/L磷酸二氢钾水溶液的pH值非常重要，一定要调整到这个值，如果是第二天继续用，也要先确认好pH值；
如果是不同的色谱柱，用的pH值可能不同，但始终都在pH为4附近做的分离效果好；
方法用到了高比例的水相，最好选一根高耐水的色谱柱，要不然柱子很快就坏掉
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安平
byron1111
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2022/5/21 15:31:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主详细说说具体的分析条件为好。


具体什么流动相？

有图么？
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